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    蘇州阿爾法生物實驗器材有限公司


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    高分辨率納米粒徑分析儀-粒度分析儀-Nanocoulter Ⅰ

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    產(chǎn)品型號

    品       牌

    廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

    所  在  地蘇州市

    聯(lián)系方式:耿少華查看聯(lián)系方式

    更新時間:2023-06-24 07:46:03瀏覽次數(shù):224次

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    經(jīng)營模式:經(jīng)銷商

    商鋪產(chǎn)品:842條

    所在地區(qū):江蘇蘇州市

    聯(lián)系人:耿少華 (經(jīng)理)

    產(chǎn)品簡介

    細(xì)胞外囊泡(Extracellular Vesicles, EVs)是指從細(xì)胞膜上脫落或者由細(xì)胞分泌的雙層膜結(jié)構(gòu)的囊泡狀小體,直徑從40nm到1000nm不等。

    詳細(xì)介紹

    高分辨率納米單顆粒分析儀 Nanocoulter Ⅰ

        一種全“芯"的細(xì)胞外囊泡檢測手段


    細(xì)胞外囊泡(Extracellular Vesicles, EVs)是指從細(xì)胞膜上脫落或者由細(xì)胞分泌的雙層膜結(jié)構(gòu)的囊泡狀小體,直徑從40nm到1000nm不等。

         胞外囊泡主要由微囊泡(Microvesicles,  MVs)和外泌體(Exosomes, Exs)組成,微囊泡是細(xì)胞激活、損傷或凋亡后從細(xì)胞膜脫落的小囊泡,直徑約為100nm – 1000nm。外泌體(exosome)是一種由細(xì)胞釋放到細(xì)胞外基質(zhì)的膜性小囊泡,直徑約為40-100nm(有說30-150nm,目前尚無定論),廣泛存在于細(xì)胞培養(yǎng)上清以及各種體液(血液、淋巴液、唾液、尿液、精液、乳汁)中,攜帶有細(xì)胞來源相關(guān)的多種蛋白質(zhì)、脂類、DNA、mRNA、miRNA等,參與細(xì)胞間通訊、細(xì)胞遷移、血管新生和免疫調(diào)節(jié)等過程。在糖尿病、心血管疾病、艾滋病、慢性炎癥疾病以及癌癥中都發(fā)現(xiàn)細(xì)胞外囊泡水平的升高,它們很有可能成為這類疾病的診斷標(biāo)志物。

         相比外泌體研究遍地開花的火熱程度(僅國內(nèi)6月份就有217篇相關(guān)論文),外泌體純化和提取方法可謂是差強(qiáng)人意。目前主流的方法有超速離心(UC)、密度梯度離心(DGC)、免疫捕獲、聚合物沉淀(Precip)、超濾(UF)、排阻色譜(SEC),以及微流控分析芯片等。往往一種提取方法無法得到足夠純度、濃度的外泌體,每種方法的適用樣品種類也不一樣。

    細(xì)胞外泌體

           圖1 細(xì)胞外囊泡的形成過程


          國際細(xì)胞外囊泡學(xué)會(ISEV)在2014年提議,對于分離獲得的外泌體需要從三個層面進(jìn)行鑒定:

    (1)Western Blot(WB)鑒定外泌體表面標(biāo)志物;

    (2)透射電鏡(TEM)鑒定外泌體形態(tài);

    (3)粒徑分析鑒定外泌體大小。免疫印跡與電鏡觀察耗時長、操作復(fù)雜、價格昂貴,在實際研究中難以做到每個外泌體樣本都去做WB與TEM,所以急需一種快速簡便的粒徑分析方法,來作為外泌體鑒定的  “先鋒" 。


    Nanocoulter Ⅰ “芯"方式助力外泌體提取純化研究


    粒度儀


      圖2 Nanocoulter Ⅰ外觀

          Nanocoulter Ⅰ 單顆粒檢測,可液體活檢、一個樣本測試僅需5-10分鐘,測試樣本可回收等特性,恰好貼合該需求,目前已經(jīng)廣泛應(yīng)用于細(xì)胞外囊泡(外泌體)的提取鑒定工作中。

    電脈沖


    圖3 Nanocoulter Ⅰ原理圖     

    Nanocoulter Ⅰ原理

    圖4 Nanocoulter Ⅰ核心技術(shù)


      納米庫爾特原理,測試過程是將待測外泌體分散在電解液中,隨其通過特定孔徑的納米孔芯片,外泌體通過納米孔的一瞬間會占用相同體積電解液的位置,在孔內(nèi)外兩電極間的電阻(恒電流設(shè)計的電路)會發(fā)生瞬時變化,產(chǎn)生電位脈沖。脈沖信號的強(qiáng)度和次數(shù)與通過納米孔的外泌體顆粒大小及數(shù)目成一定比例,直接將脈沖信號進(jìn)行轉(zhuǎn)換,即可獲得檢測樣品中外泌體的粒徑和粒子數(shù)信息。



    Nanocoulter Ⅰ采用新一代電學(xué)原理,

    ?單顆粒檢測,顆粒粒徑、濃度、zeta電位、形態(tài)多維度檢測

    ?不受樣本吸光度、折射率影響,與樣本光學(xué)性質(zhì)無關(guān)

    ?與顆粒布朗運(yùn)動無關(guān),不受樣品黏度影響

    ?顆粒之間無干擾,對多分散樣本有很好的測試效果

    ?高分辨率,可精確看到樣本團(tuán)聚、破裂、沉降等細(xì)微變化



    選型表選型表

    Nanocoulter Ⅰ  性能參數(shù):

        檢測的粒度范圍:40nm-2μm
        尺寸測定精度:1nm
        濃度范圍:1E+06~1E+12個/mL
        樣本量:50μL
        重復(fù)性誤差:<10%
        粒徑準(zhǔn)確性誤差:<10%
        濃度準(zhǔn)確性誤差:<20%

         隨著研究的深入,更多的分離提取外泌體的方法被開發(fā)出來,也有多種提取方法聯(lián)用的方式,看似百花齊放,實則良莠不齊,甚至都不盡如人意。Nanocoulter Ⅰ 逐個測量外泌體粒徑,得到外泌體的真實粒徑濃度分布,可快速判斷提取方法的優(yōu)劣。

    粒度分析儀


    圖5 不同分離提取方法的外泌體粒徑測定


           Nanocoulter Ⅰ單顆粒檢測,得到所有顆粒的真實分布狀況,快、準(zhǔn)、狠地判別提取方法的優(yōu)劣性,大大節(jié)省了時間和人力成本。

    Nanocoulter Ⅰ “快"
          測量核心元器件芯片,采用激光刻蝕,納米孔一致性非常高,并且所有對標(biāo)信息均已裝入檢測卡中的二維碼中,因此儀器無需再次校準(zhǔn)、對標(biāo)等繁瑣測試前步驟,節(jié)省了大量寶貴的時間。一卡一碼,掃描二維碼,加入樣本,即可開始測試。并且樣本只存在于插入式檢測卡樣品槽中,檢測過程中不影響外泌體活性,寶貴的外泌體樣本測試完成后可回收做后續(xù)研究。
    Nanocoulter Ⅰ“準(zhǔn)"

           Nanocoulter Ⅰ的原理決定測得的數(shù)據(jù)為真實粒徑信息,無需經(jīng)過反演算或者推導(dǎo)得出,并且配備多種尺寸的已知粒徑和濃度的標(biāo)準(zhǔn)顆粒(60-300nm,20nm一個梯度)來作為基線數(shù)據(jù),實現(xiàn)測量數(shù)據(jù)的定量校準(zhǔn),確保粒徑、濃度數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確。無論是不同粒徑的混合樣本,還是有細(xì)微差異的同粒徑樣本,均能準(zhǔn)確無誤的辨別出來。

    粒度儀

    圖6 不同廠家生產(chǎn)的標(biāo)準(zhǔn)微球的細(xì)微差異


    Nanocoulter Ⅰ“狠"
          Nanocoulter Ⅰ在經(jīng)典庫爾特原理的基礎(chǔ)上,深耕微納加工技術(shù)十余年,具有原子級別(1納米以下)精度微加工能力,分辨率可達(dá)1nm。納米孔每通過一個顆粒就產(chǎn)生一個電位脈沖,因此樣本中所有外泌體顆粒均能準(zhǔn)確測量,實現(xiàn)真正意義上的的單顆粒檢測。測試過程可直觀的看到外泌體樣本中外泌體顆粒的真實分布情況,測試完成即可立即輸出報告。

    實驗室儀器

    圖7 外泌體樣本檢測信號脈沖圖

    瑞芯

     圖8 外泌體樣本測試報告


    應(yīng)用領(lǐng)域:

    • 脂質(zhì)體、病毒與類病毒顆粒生產(chǎn)品質(zhì)把控及標(biāo)準(zhǔn)制定(mRNA疫苗 細(xì)胞治療、基因治療);

    • 細(xì)胞外囊泡、外泌體不同提取方法的篩選,外泌體的鑒定;

    • 藥物載體、蛋白質(zhì)、疫苗、人造乳糜顆粒的粒徑、濃度測定,生產(chǎn)批間差控制;

    • 血細(xì)胞、血小板、細(xì)菌(油田等)、免疫檢測功能顆粒等微粒的計數(shù);

    • 聚苯乙烯微球、磁珠顆粒等有機(jī)和無機(jī)顆粒品質(zhì)把控;

    • 化妝品、半導(dǎo)體、工業(yè)涂料、染料與墨水化學(xué)、機(jī)械拋光、催化劑等工業(yè)生產(chǎn)材料性能研究。


    外泌體





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