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    蘇州阿爾法生物實驗器材有限公司


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    細胞轉染試劑-QuickShuttle-Basic

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    產品型號

    品       牌

    廠商性質經銷商

    所  在  地蘇州市

    聯(lián)系方式:耿少華查看聯(lián)系方式

    更新時間:2023-06-18 09:43:12瀏覽次數:121次

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    經營模式:經銷商

    商鋪產品:842條

    所在地區(qū):江蘇蘇州市

    聯(lián)系人:耿少華 (經理)

    產品簡介

    細胞轉染試劑-QuickShuttle-Basic 用途:(1)用于大多數哺乳動物貼壁細胞系的瞬時轉染和穩(wěn)定細胞系構建;(2)用于大多數哺乳動物原代細胞和二倍體細胞的瞬時轉染。

    詳細介紹

     細胞轉染試劑-QuickShuttle-Basic

    細胞轉染試劑-QuickShuttle-Basic


      QuickShuttle 系列轉染試劑屬于陽離子型轉染試劑,具有高的效率、低毒和易于使用等特點,推薦用于常規(guī)哺乳動物細胞系的瞬時轉染和穩(wěn)定細胞系構建。
      QuickShuttle 區(qū)別于常規(guī)轉染試劑的兩個最主要特點是:
      (1)可在貼壁細胞傳代尚未貼壁時立即進行轉染(立傳立轉);
      (2)轉染操作可在一分鐘內完成。因此,QuickShuttle 適合用于快速大量瞬時轉染表達目的蛋白。
      QuickShuttle系列轉染試劑選擇一覽表
       
      產品名稱 貨號 規(guī)格 產品用途
      QuickShuttle-Basic KX0110041 0.8ml 適用于大多數哺乳動物貼壁細胞系,可用于原代細胞和二倍體細胞
      QuickShuttle-Enhanced KX0110042 0.8ml 適用于大多數哺乳動物細胞系,專用于難轉細胞系
      QuickShuttle-Superfast KX0110043 0.8ml 細胞消化和轉染同時進行,立傳立轉。可用于懸浮細胞
      QuickShuttle-293 KX0110044 0.8ml 專用于各種293細胞,立傳立轉
      QuickShuttle-Hela KX0110045 0.8ml 專用于Hela細胞,立傳立轉
      QuickShuttle-BHK-21 KX0110046 0.8ml 專用于BHK-21細胞,立傳立轉

      細胞轉染試劑-QuickShuttle-Basic使用說明:

       貨號:KX0110041 

      含量:0.8 ml 

      用途:(1)用于大多數哺乳動物貼壁細胞系的瞬時轉染和穩(wěn)定細胞系構建; 

      (2)用于大多數哺乳動物原代細胞和二倍體細胞的瞬時轉染。

      使用方法:

       1. 轉染前 18~24 小時接種細胞到 24 孔細胞板中,每孔 5~10×104細胞,1ml 培養(yǎng)基。

      備注:如果篩 選抗藥性穩(wěn)定細胞系,可以考慮簡化的實驗步驟,即在細胞傳代后直接按下述步驟 2~5 進行轉染,無 需 18~24 小時的等候時間。

       2. 將 2μg 質粒 DNA 和 3~5μl 轉染試劑分別稀釋到 50μl 生理鹽水中。

      備注:質粒 DNA 和轉染試劑的量需要根據不同培養(yǎng)基來優(yōu)化,但理論上不超出 1~2µg 和 3~5µl 范圍。

       3. 合并上述兩溶液并混勻。備注:無需其它轉染試劑所需的 10~30 分鐘的等候時間。

       4. 將上述復合物直接加入到細胞培養(yǎng)基中,輕搖細胞板或用加樣器吸打混勻。

      備注:轉染復合物可直接 加入含血清的細胞培養(yǎng)基中進行轉染。在極少情況下會出現(xiàn)貼壁細胞脫落現(xiàn)象,可先從待轉染細胞孔 中吸取 500µl 培養(yǎng)基與轉染復合物預混后再加入細胞中。若在細胞瓶中進行轉染,直接加入到無細胞 貼壁的對面或側面并搖勻即可。 

      5. 將細胞板移至 37oC/5% CO2 孵箱中進行培養(yǎng)。備注:無需在轉染后 4~6 小時補加血清或更換培養(yǎng) 基。

       6. 24~72 小時后根據實驗需要進行瞬時表達分析或穩(wěn)定細胞系加壓篩選。

      QuickShuttle轉染效果圖


        QuickShuttle-Basic 轉染試劑使用注意事項:

         1. 質粒 DNA:請用能夠去除內毒素的方法制備高質量的質粒 DNA。 

        2. 稀釋液:0.85%(W/V)生理鹽水,用低內毒素純水配制,高壓消毒或除菌過濾。 

        3. 培養(yǎng)基:經過 DMEM、RPMI-1640 和 M199 等常規(guī)培養(yǎng)基測試,推薦使用含 5~10%牛血清的 DMEM,若轉染效果不理想可嘗試其它培養(yǎng)基。 

        4. 以 24 孔細胞板轉染實驗為例,推薦每孔低內毒素質粒 DNA 用量為 2µg、轉染試劑用量為 3~5µl,請在正式實驗前根據不同細胞和不同培養(yǎng)基用報告基因進行優(yōu)化。 

        5. 如果實驗目的在于篩選抗藥性穩(wěn)定細胞系,可在細胞傳代后尚未貼壁時直接進行轉染,從而可節(jié)省 18~24 小時的轉染前細胞培養(yǎng)時間。


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