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    蘇州阿爾法生物實驗器材有限公司


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    細(xì)胞轉(zhuǎn)染-QuickShuttle-Enhanced-轉(zhuǎn)染試劑增強型

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    產(chǎn)品型號

    品       牌

    廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

    所  在  地蘇州市

    聯(lián)系方式:耿少華查看聯(lián)系方式

    更新時間:2023-04-09 07:46:01瀏覽次數(shù):110次

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    經(jīng)營模式:經(jīng)銷商

    商鋪產(chǎn)品:842條

    所在地區(qū):江蘇蘇州市

    聯(lián)系人:耿少華 (經(jīng)理)

    產(chǎn)品簡介

    細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑 QuickShuttle-Enhanced 增強型 貨號:KX0110042 含量:0.8 ml 用途:(1)用于大多數(shù)哺乳動物貼壁細(xì)胞系的瞬時轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定細(xì)胞系構(gòu)建; (2)用于難轉(zhuǎn)哺乳動物細(xì)胞系的瞬時轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定細(xì)胞系構(gòu)建。

    詳細(xì)介紹

    細(xì)胞轉(zhuǎn)染-QuickShuttle-Enhanced-轉(zhuǎn)染試劑增強型

    增強型轉(zhuǎn)染試劑

    貨號:KX0110042 

    含量:0.8 ml 

    用途:

    (1)用于大多數(shù)哺乳動物貼壁細(xì)胞系的瞬時轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定細(xì)胞系構(gòu)建; 

    (2)用于難轉(zhuǎn)哺乳動物細(xì)胞系的瞬時轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定細(xì)胞系構(gòu)建。

     注意事項:

     1. 質(zhì)粒 DNA:請用能夠去除內(nèi)毒素的方法制備高質(zhì)量的質(zhì)粒 DNA。

     2. 稀釋液:0.85%(W/V)生理鹽水,用低內(nèi)毒素純水配制,高壓消毒或除菌過濾。

     3. 培養(yǎng)基:經(jīng)過 DMEM、RPMI-1640 和 M199 等常規(guī)培養(yǎng)基測試,推薦使用含 5~10%牛血清的 DMEM,若轉(zhuǎn)染效果不理想可嘗試其它培養(yǎng)基。

     4. 以 24 孔細(xì)胞板轉(zhuǎn)染實驗為例,推薦每孔低內(nèi)毒素質(zhì)粒 DNA 用量為 1~2µg、轉(zhuǎn)染試劑用量為 3~5µl, 請在正式實驗前根據(jù)不同細(xì)胞和不同培養(yǎng)基用報告基因進(jìn)行優(yōu)化。

     5. 如果實驗?zāi)康脑谟诤Y選抗藥性穩(wěn)定細(xì)胞系,可在細(xì)胞傳代后尚未貼壁時直接進(jìn)行轉(zhuǎn)染,從而可節(jié)省 18~24 小時的轉(zhuǎn)染前細(xì)胞培養(yǎng)時間。 使用方法:

     1. 轉(zhuǎn)染前 18~24 小時接種細(xì)胞到 24 孔細(xì)胞板中,每孔 5~10×104細(xì)胞,1ml 培養(yǎng)基。

    備注:如果篩 選抗藥性穩(wěn)定細(xì)胞系,可以考慮簡化的實驗步驟,即在細(xì)胞傳代后直接按下述步驟 2~5 進(jìn)行轉(zhuǎn)染,無 需 18~24 小時的等候時間。

     2. 將 1~2μg 質(zhì)粒 DNA 和 3~5μl 轉(zhuǎn)染試劑分別稀釋到 50μl 生理鹽水中。

    備注:質(zhì)粒 DNA 和轉(zhuǎn)染試劑的 量需要根據(jù)不同細(xì)胞和不同培養(yǎng)基來優(yōu)化,但理論上不超出 1~2µg 和 3~5µl 范圍。 

    3. 合并上述兩溶液并混勻。備注:無需其它轉(zhuǎn)染試劑所需的 10~30 分鐘的等候時間。 

    4. 將上述復(fù)合物直接加入到細(xì)胞培養(yǎng)基中,輕搖細(xì)胞板或用加樣器吸打混勻。

    備注:轉(zhuǎn)染復(fù)合物可直接 加入含血清的細(xì)胞培養(yǎng)基中進(jìn)行轉(zhuǎn)染。在極少情況下會出現(xiàn)貼壁細(xì)胞脫落現(xiàn)象,可先從待轉(zhuǎn)染細(xì)胞孔中吸取 500µl 培養(yǎng)基與轉(zhuǎn)染復(fù)合物預(yù)混后再加入細(xì)胞中。若在細(xì)胞瓶中進(jìn)行轉(zhuǎn)染,直接加入到無細(xì)胞 貼壁的對面或側(cè)面并搖勻即可。

     5. 將細(xì)胞板移至 37oC/5% CO2 孵箱中進(jìn)行培養(yǎng)。備注:無需在轉(zhuǎn)染后 4~6 小時補加血清或更換培養(yǎng) 基。

     6. 24~72 小時后根據(jù)實驗需要進(jìn)行瞬時表達(dá)分析或穩(wěn)定細(xì)胞系加壓篩選。


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