蘇州阿爾法生物實(shí)驗(yàn)器材有限公司
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更新時(shí)間：2022-06-19 10:54:06瀏覽次數(shù)：303次
聯(lián)系我時(shí)，請告知來自 儀表網(wǎng)碧云天細(xì)胞凋亡檢測試劑盒AexiV-FITC細(xì)胞凋亡試劑盒
| 產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品包裝 | |
| C1062S | Annexin V-FITC細(xì)胞凋亡檢測試劑盒 | 20次 | |
| C1062M | Annexin V-FITC細(xì)胞凋亡檢測試劑盒 | 50次 | |
| C1062L | Annexin V-FITC細(xì)胞凋亡檢測試劑盒 | 100次 | |
Annexin V-FITC細(xì)胞凋亡檢測試劑盒(Annexin V-FITC Apoptosis Detection Kit)是用FITC標(biāo)記的重組人Annexin V來檢測細(xì)胞凋亡時(shí)出現(xiàn)在細(xì)胞膜表面的磷脂酰的一種細(xì)胞凋亡檢測試劑盒。可以使用流式細(xì)胞儀、熒光顯微鏡或其它熒光檢測設(shè)備進(jìn)行檢測。
Annexin是一類廣泛分布于真核細(xì)胞細(xì)胞漿內(nèi)鈣離子依賴的磷脂結(jié)合蛋白，參與細(xì)胞內(nèi)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)。但僅Annexin V被報(bào)道可以調(diào)控一些PKC的活性。
Annexin V選擇性結(jié)合磷脂酰(phosphatidylserine，簡稱PS)。磷脂酰主要分布在細(xì)胞膜內(nèi)側(cè)，即與細(xì)胞漿相鄰的一側(cè)。在細(xì)胞發(fā)生凋亡的早期，不同類型的細(xì)胞都會把磷脂酰外翻到細(xì)胞表面，即細(xì)胞膜外側(cè)。磷脂酰暴露到細(xì)胞表面后會促進(jìn)凝血和炎癥反應(yīng)。而Annexin V和外翻到細(xì)胞表面的磷脂酰結(jié)合后可以阻斷磷脂酰的促凝血和促炎癥反應(yīng)活性。
用帶有綠色熒光的熒光探針FITC標(biāo)記的Annexin V，即Annexin V-FITC，就可以用流式細(xì)胞儀或熒光顯微鏡非常簡單而直接地檢測到磷脂酰的外翻這一細(xì)胞凋亡的重要特征。
本試劑盒還提供了碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)染色液，碘化丙啶可以染色壞死細(xì)胞或凋亡晚期喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，呈現(xiàn)紅色熒光。對于壞死細(xì)胞，由于細(xì)胞膜的完整性已經(jīng)喪失，Annexin V-FITC可以進(jìn)入到細(xì)胞漿內(nèi)，與位于細(xì)胞膜內(nèi)側(cè)的磷脂酰結(jié)合，從而也使壞死細(xì)胞呈現(xiàn)綠色熒光。
本試劑盒的流式檢測效果參考圖1和圖2，熒光顯微鏡檢測效果參考圖3。
圖1.細(xì)胞用本試劑盒染色后流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡的效果圖。Jurkat細(xì)胞未經(jīng)處理(A)或用10μM(Camptothecin)作用4小時(shí)(B)后，用本試劑盒染色，然后用流式細(xì)胞儀進(jìn)行細(xì)胞的散射和熒光檢測。從圖中可以看出，經(jīng)過凋亡誘導(dǎo)劑處理后的細(xì)胞，其Annexin V-FITC染色陽性并且PI染色陰性的細(xì)胞，即凋亡細(xì)胞，明顯增加(B圖的右下象限)，Annexin V-FITC和PI染色雙陽性的細(xì)胞，即壞死細(xì)胞，也有所增加(B圖的右上象限)。圖中Annexin V-FITC染色陰性PI染色陽性(Annexin V-/PI+)所在象限(A和B圖的左上象限)出現(xiàn)的細(xì)胞點(diǎn)是許可范圍內(nèi)的檢測誤差。實(shí)測數(shù)據(jù)可能會因細(xì)胞類型、細(xì)胞凋亡情況、檢測儀器等的不同而存在差異，圖中數(shù)據(jù)僅供參考。
圖2.細(xì)胞用本試劑盒染色后流式細(xì)胞儀檢測效果驗(yàn)證圖。Jurkat細(xì)胞用10μM(Camptothecin)作用4小時(shí)后，未經(jīng)染色(A)、僅用本試劑盒中的PI進(jìn)行染色(B)、僅用本試劑盒中的Annexin V-FITC進(jìn)行染色(C)、用本試劑盒中的Annexin V-FITC和PI進(jìn)行雙染(D)。從圖中可以看出，未經(jīng)染色的是雙陰性細(xì)胞(A)，僅PI染色后出現(xiàn)了預(yù)期的PI染色陽性的細(xì)胞，僅Annexin V-FITC染色出現(xiàn)了預(yù)期的Annexin V-FITC染色陽性的細(xì)胞，Annexin V-FITC和PI雙染出現(xiàn)了預(yù)期的僅Annexin V-FITC染色陽性的凋亡細(xì)胞和雙陽性的壞死細(xì)胞。出現(xiàn)的非預(yù)期的細(xì)胞點(diǎn)*在許可的誤差范圍內(nèi)。實(shí)測數(shù)據(jù)可能會因細(xì)胞類型、細(xì)胞凋亡情況、檢測儀器等的不同而存在差異，圖中數(shù)據(jù)僅供參考。
本試劑盒小包裝C1062S可以檢測20個(gè)樣品，中包裝C1062M可以檢測50個(gè)樣品，大包裝C1062L可以檢測100個(gè)樣品。
包裝清單：
| 產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品名稱 | 包裝 |
| C1062M-1 | Annexin V-FITC | 250μl |
| C1062M-2 | Annexin V-FITC結(jié)合液 | 30ml |
| C1062M-3 | 碘化丙啶染色液 | 550μl |
| — | 說明書 | 1份 |
保存條件：
4℃保存，半年有效。-20℃保存，一年有效。Annexin V-FITC和碘化丙啶染色液需要避光保存。為了長期保存，可以把碘化丙啶染色液適當(dāng)分裝后-20℃保存。
注意事項(xiàng)：
盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響，但為取得良好的使用效果，3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存，并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融。
如果有細(xì)菌或真菌污染，會嚴(yán)重影響檢測效果。
染色后宜盡快檢測，時(shí)間過長可能會導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加。
如果細(xì)胞收集過程中使用了，需注意設(shè)法去除殘留的。殘留的會消化并降解Annexin V-FITC，導(dǎo)致染色失敗。
熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅，在進(jìn)行熒光觀察時(shí)，盡量縮短觀察時(shí)間，同時(shí)在操作和存放過程中也盡量注意避光保存。
用于流式細(xì)胞儀檢測時(shí)，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過多的PI假陽性細(xì)胞，并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測，這樣通常可以有效減少假陽性的壞死細(xì)胞。
需自備PBS。
本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
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