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    非洲豬瘟檢測試劑盒廠家選擇風途可不錯哦

    閱讀:541      發布時間:2021-7-26
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      非洲豬瘟檢測試劑盒廠家【Abakora ibicuruzwa byo muri Afurika byingurube】非洲豬瘟檢測試劑盒生產廠家選擇風途,型號為FT-ZWSJ2

      非洲豬瘟是一種非洲豬瘟屬病毒,病毒粒子為20面體對稱,直徑約200mm。病毒帶有囊膜,分為22個不同基因型,只有1個不同的血清型。非洲豬瘟在生豬和野豬的白細胞都可復制,尤其是養殖生豬。因為非洲豬瘟病例發生在1921年的肯尼亞,而后傳播到安哥拉、蘇丹、贊比亞等地,因此被稱為“非洲豬瘟"。非洲豬瘟有著高傳染性,豬群、野豬是主要傳播途徑,無法傳染給狗、貓、羊等動物,人也不會傳染。不過,DNA病毒在兔子體內盲傳26代,對豬依然有致死性。該病有無季節性、無日齡性特點,全年均可出現,一旦患病將快速傳播導致生豬大批量死亡,健康的生豬感染病毒將迅速暴發。

    非洲豬瘟檢測試劑盒

      非洲豬瘟病毒熒光PCR核酸檢測試劑盒說明書

      【獸藥名稱】

      通用名稱:非洲豬瘟病毒熒光PCR核酸檢測試劑盒

      漢語拼音:Feizliouzhuwen Bingdu Yingguang PCR Hesuan Jianceshijihe

      英文名稱:African swine Fever Virus (ASFV) PCR Nucleic Acid Diagnostic Kit

      商品名稱:無

      【主要成分與含量】試劑盒中含有如下組分:

    試劑盒組分

    含量

    陽性對照

    250μL/管×1管


    陰性對照

    250μL/管×1管


    PCR反應液

    850μL/管×1管


    萌混合液

    150μL/管×1管


    說明書

    1份/盒

    【作用與用途】 本試劑盒可用于血液、脾臟、肝臟、淋巴結、  樣品中非洲豬瘟病毒核酸的檢測。

    扁桃體、腎臟、肌肉、環境樣品等

      【用法與判定】

      1 用法

      1.1待檢樣品釆集、保存及運輸

      1.1.1樣品釆集

      (1) 活豬樣品 無菌采集抗凝血或血清5mL

      (2) 病死豬剖檢樣品或屠宰場剖檢樣品 無菌采集死豬的牌、肺、腎、扁桃體、淋巴結、肌肉等組織樣品。2?8°C低溫運至實驗室用于檢測。

      (3) 病豬污染的周邊環境 采集與病豬相關場所的糞便、飼料、污水樣品。2?8°C低溫運至實驗室用于檢測。

      1.1.2樣品保存 采集的樣品在2?8°C保存應不超過24小時,-70°C條件下保存,避免反復凍 融。

      1.1.3樣品運輸泡沫箱加冰袋后密封進行運輸。包裝和運輸應符合《高致病性動  物病原微生物菌(毒)種或者樣品運輸包裝規范》和關于危險品運輸管理的有關規定。

      1.2樣品處理

      1.2.1血液樣品處理 抗凝血樣品置于離心管中,8000 r/min離心2分鐘取上層血漿,編號待 檢。非抗凝血樣品置于離心管中,待凝固后,8000  r/min離心2分鐘取200μL上層血清,編號待檢。

      1.2.2組織樣品處理取適量脾臟、肝臟、淋巴結、扁桃體、肌肉等組織,置于研磨器或研磨管中研磨,再加適量生理鹽水混勻,制成約10%的組織勻漿,8000  r/min離心2分鐘,取200μL上 清于RNase/DNase-free無菌離心管中,編號備用。

      1.2.3環境樣品處理

      1.2.3.1糞便、飼料樣品處理方法取適量的糞便、飼料放入盛有PBS緩沖液的研磨管中研磨混勻,制成約10%的勻漿液.8000  r/min離心2分鐘,取200μL上清于RNase/DNase-free無菌離心 管中,編號備用。

      1.2.3.2污水樣品處理方法 直接取200μL污水進行核酸提取。

      1.3病毒核酸的提取用磁珠法或柱式法進行DNA核酸提取。

      1.4熒光PCR反應:

      1.4.1從試劑盒中取出熒光PCR反應液、酶混合液,室溫融化后,2000 r/min離心5秒。設被  檢樣品、陽性對照和陰性對照總和為n,則反應體系配制如下:

      試劑 體系

      PCR 反應液 17× (n+1) μL

      酶混合液 3× (n+1) μL

      1.4.2在新的RNase/DNase-fire 1.5 ml離心管中加入上述試劑,充分混勻后瞬時離心。按照20μL/  管分裝量將試劑分裝至熒光PCR反應管。

      1.4.3在上述制備好的熒光PCR反應管中分別加入陰性對照、陽性對照各5μL、處理好的待測核酸各5μL,終體積25μL/管,蓋好熒光PCR反應管蓋,混勻后瞬時離心,轉移到熒光PCR儀器  上。

      144將PCR反應管放置在熒光PCR儀樣品槽中,在熒光PCR儀上運行以下程序:

    步驟

    條件

    循環數

    UNG處理

    50 ℃, 2分鐘

    1

    預變性

    95 ℃, 3分鐘

    1

    預擴增

    95  ℃: 8 秒 55 ℃: 8 秒


    5

    PCR擴増

    95  ℃: 8 秒 55 ℃: 8 秒


    40

      熒光通道選擇FAM,在PCR擴增階段每個循環的55℃時采集熒光信號。設置擴增體系為25μL, 同時要選擇passive  reference和quencher為none的模式。(注:若熒光PCR儀(如AB17500)按說明  書中的反應程序設置后因持溫時間短無法運行,可將預擴增和PCR擴增條件變更為95C: 5秒 55°C: 30 秒)

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