為了生存,細胞需要 ATP 形式來提供能量維持正常生理活性。這種形式的能量是通過糖酵解和線粒體呼吸過程產生的。當兩者都產生 ATP 時,糖酵解在缺乏氧氣的情況下可以發揮作用,而線粒體在氧化磷酸化 (OXPHOS) 的最后一步需要氧氣參與產生 ATP。這些途徑在適應環境壓力、底物可用性和缺氧的同時,動態地轉變以滿足細胞的能量需求。一般而言,測量其動態的變化提供了比單點測量 ( 例如 ATP 終點法 ) 更多的關于代謝反應的信息。呼吸作用受到抑制是藥物毒性后線粒體功能紊亂的重要、敏感指標。線粒體功能的異常與越來越多的疾病有關,從神經退行性病變到癌癥。
了解這些途徑是如何應對效應化合物作出何種反應,可以為了解細胞的整體功能和決定細胞命運的潛在機制提供有用的見解。
新型檢測試劑盒的出現和更多功能微孔板讀板機的問世,為實現基于微孔板形式的代謝分析提供了有效的手段。這里,我們描述了在 SpectraMax® i3x 微孔讀板機上使用 Agilent MitoXpress® Xtra 耗氧量分析和 Agilent pH-Xtra™ 糖酵解分析。
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