BRET ( 生物發光共振能量轉移 ) 是一種測量蛋白 - 蛋白或蛋白 - 配體相互作用的技術,涉及生物發光供體和熒光受體的相互作用。當供體和受體彼此相距小于 10 nm時,供體激發受體,然后受體發射熒光。通過用供體標記一種目的蛋白,用受體標記該目的蛋白的結合配體,可以使用酶標儀來檢測供體和受體發射的光,從而測量蛋白質相互作用。
Promega 的 NanoBRET™ 技術通過使用更亮的發光供體 ( NanoLuc 熒光素酶 )、優化的能量受體 (HaloTag®-NCT) 以及供體和受體波長之間更寬的分離,改進了早期的BRET,包括 BRET1 和 BRET2 ( 見圖一 ) 不足。這些改進提供了更強的信號,更好的靈敏度和更低的背景,使得在活細胞內檢測蛋白質相互作用成為可能。
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