雙鏈 DNA (dsDNA) 定量是許多下游分子生物學實驗的重要前提,如 qPCR,質粒轉染, 下一代基因測序等。DNA 定量通常是使用紫外分光光度法進行測定。但是它不能定量濃度在 250 ng/mL 以下的 DNA,且它需要一個相對較大的樣本體積。結果也會受到像 RNA,蛋白等雜質的影響。相較于紫外分光光度法,熒光法由于具有更高的靈敏度和特異性,是測定 dsDNA 濃度的主要方法。
Molecular Devices 公司推出的一系列SpectraMax Quant dsDNA 定量試劑盒可以準確定量線性范圍在 0.5 pg/μL-200 ng/μL的 dsDNA。通常這種熒光實驗在 96 孔板內進行。對于有價值的樣本和高通量的需求,該實驗可使用 384 孔板進行。在 此 篇 應 用 文 章 中 , 我 們 展 示 了 使 用SpectraMax Quant dsDNA 分析試劑盒在384 孔板內進行 dsDNA 定量的設置和操作步驟。這種方法既保存了珍貴的 DNA 樣
本,也減少了微孔板的使用數量。
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