Molecular Devices 的 IMAP® 技術能對激酶,磷酸酶和磷酸二酯酶進行快速,均質和非放射性的分析,非常適用于分析開發和高通量篩選。IMAP 檢測是基于磷酸基團與固定在納米微粒表面的三價金屬陽離子之間的高親和力結合。可以使用 FP 與TR - FRET 兩種讀數方法來檢測磷酸化底物與納米微粒相互的結合情況。在 FP 方法中,當 IMAP 結合溶液與磷酸化底物結合時,肽的分子運動被改變,引起標記在肽上的熒光分子的熒光偏振效應 (FP) 增加( 圖 1,左 )。在 TR - FRET 方法中,當存在磷酸化的熒光底物時,鋱 (Tb) 供體能夠與底物熒光受體發生熒光能量轉移 ( 圖 1,右 )。該方法使用時間分辨熒光 (TRF) 檢測模式,能夠消除了測定組分或篩選中化合物的熒光干擾,并且底物尺寸和濃度的選擇更靈活。
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