蛋白質的內源熒光主要來源于芳香族氨基酸如色氨酸、酪氨酸和苯丙氨酸。在水中，色氨酸的最大激發光波長在270-280nm左右而其發射光波長峰值接近350nm。蛋白的發射光譜對溶劑的極性和外界環境十分敏感。當蛋白質變性時，色氨酸殘基會暴露在水中而其發射波長會變長。這種發射波長峰值的改變可以用來檢測蛋白質的變性。

在這里，我們將展示如何運用SpectraMax®iD3多功能微孔板讀板機檢測內源色氨酸熒光。色氨酸標準曲線用來顯示檢測方法的高靈敏性，而色氨酸發射峰值的偏移則用溶菌酶變性實驗來檢測。溶菌酶包含有兩個色氨酸殘基，因此受到紫外光照射時會發射熒光。當溶菌酶降解時，色氨酸的發射光峰值會偏移6-10nm。我們可以對降解前后的溶菌酶進行熒光光譜掃描來捕獲和檢測發生的峰值偏移。

SpectraMax® iD3多功能微孔板讀板機兼具內源色氨酸熒光檢測所需的高靈敏度和波長掃描能力。另外，SoftMax® Pro 軟件可以通過Spectral Optimization Wizard自動識別最最佳的激發和發射波長，同時自動計算發射峰值的偏移，并用于后續分析。
 

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