炎癥反應(yīng)的一個重要步驟是細(xì)胞表面抗原與血管中免疫細(xì)胞的特異 性 結(jié) 合 。 因 此 , 對 這 些 分 子 變 化 的 及 時 監(jiān) 控 , 如 V C A M ,E-selectin,以及內(nèi)皮細(xì)胞上的HLADR等等,可以為細(xì)胞水平的炎癥模型提供有效的生理指標(biāo)上的支持。我們用多通道熒光讀取人原代細(xì)胞表面的炎癥標(biāo)記,并在此基礎(chǔ)上評估不同介質(zhì)對炎癥反應(yīng)的調(diào)節(jié)作用。例如,在用炎癥因子(TNF 或者 IFN)刺激原代內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)后,細(xì)胞表面的炎癥標(biāo)記表達(dá)可以通過檢測與之結(jié)合的預(yù)染抗體的總熒光強度來定量。我們在多個指標(biāo)如增加組間差異,重復(fù)性和通量上對IsoCyte 掃描細(xì)胞計數(shù)儀和SpectraMax® M5 微孔板讀板機進行了比較。多通路的讀值在檢驗抗炎化合物的有效性和毒性的同時,還可以通過選擇性抑制不同信號通路激活的炎癥標(biāo)記來深入的研究相關(guān)機制。
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