在體外細胞培養實驗中模擬出組織或體內復雜環境下的代謝和生理反應,一直是科研工作者的愿望,因為這樣可以在節約成本的同時得到更可靠的數據。如果培養條件可以動態的產生濃度梯度,并具有自我更新能力,便可以達到此要求。SciFlow™ 1000流體培養系統外觀為標準的多孔板,它具有8條獨立的流體通道,不需要外加的泵或其他管路的幫助,通過自身特殊設計的孔間的高度差產生流體動力及濃度梯度,是一款操作更簡單的流體動力培養系統。聯合使用ImageXpress Micro高內涵成像系統,得利于ImageXpress Micro*的板型設置能力,自動調整聚焦面以適應流體板孔間高度差異,從而實現實時觀測藥物對細胞的影響。
高內涵系統設置自動聚焦
將SciFlow 1000板子每孔均種上HepG2細胞,用Hoechst染料染細胞核。通過ImageXpress Micro XLS板底厚度測量功能測出每孔間Z軸位置的高度差(如圖所示),根據此數值設置板型,使其可自動識別不同孔,并自動聚焦。
實驗
實驗流程圖和種板設計如圖所示,HepG2細 胞 或 熒 光 素 被 種 在 每 個 孔 中 , 用Hoechst染全部細胞核,CellTox Green染凋亡細胞。藥物孔中的Aflatoxin B或培養基和熒光素每天更換三次,連續培養
及拍攝四天。四天中,含藥物或不含藥物的培養基持續增加濃度并更新,在孔間產生連續的濃度梯度差,通過高內涵的圖像分析功能,得到熒光變化曲線。本文通過評價Aflatoxin B對肝細胞的影響,測評流體培養系統和高內涵成像分
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