分光光度計是一種廣泛使用的光學式分析儀器，為保證這種分析儀器的準確可靠，國家技術將其列為強檢儀器，并先后頒布了各類分光光度計的檢定規程。為了配合檢定規程的實施，近年來各醫學計量機構都相繼配備了標準濾光片用于各類分光光度計的檢定。但是，由于分光光度計的種類繁多，各種分光光度計其適用的檢定規程及標準術光片也不盡相同，因此在具體檢定過程中，部分計量人員往往感到難以開展或不能完成某臺機器檢定的全過程。下面就幾種主要標準濾光片在分光光度計檢定中的應用方法作一介紹。
1、鐠釹濾光片和氧化鈥濾光片
鐠釹濾光片和氧化鈥濾光片是一種具有特征吸收峰(或透射峰)的波長標準物質，其吸收峰多而穩定，波長范圍分別是: 400~900nm(鐠釹濾光片)、200~700nm (氧化鈥濾光片)，主要用于檢定紫外、可見分光光度計的波長準確度與波長重復性，特別適用于具有自動掃描功能的分光光度計上述兩項指標的檢定。
其檢定方法是:①接通被檢儀器電源,預熱30分鐘；②設置儀器參數：置儀器于波長掃描方式，帶寬為2.0nm、響應速度“中"、數據方式為“吸光度"、波長范圍為200nm~900nm;③不放任何樣品對儀器進行99%基線校正;④將濾光片垂直放入樣品架，以空氣為參比進行波長掃描，測出吸收光譜;⑤利用儀器的數據處理功能找出濾光片的吸收峰值波長，根據規程要求在紫外光區內選1個峰值點，可見光區內選3個峰值點,連續測定3次。
對于不具有自動掃描功能的儀器，在檢定時也要先對儀器進行預熱、校正，采用逐點測試法測定吸收峰值。手動掃描找點往往難以掌握,必須在吸收點上下反復多次才能確定。
2、雜散光濾光片
雜散光是指射到儀器探測器上的與測試波長不同的其它波長的光,是分光光度計的重要誤差來源之一,因此雜散光也是分光光度計的一項重要技術指標。此組濾光片共有4塊,編號為：065-22、065- 38、065- 42、065一70,分別對應220nm、380nm、 420nm、700nm.其在對應的波長處的透射比等于零。所以選用某一雜散光濾光片所測定的被檢儀器的透射比值,即為該儀器在測試波長下的雜散光。
檢定規程對不同的分光光度計的雜散光測定規定了相應的測試波長，紫外可見分光光度計的測試波長為220nm和 380nm，棱鏡式可見分光光度計的測試波長為420nm和700nm，光柵式可見分光光度計的測試波長為380nm，因此在檢定時必須根據不同的儀器選用合適的濾光片。具體方法是:①使被檢儀器通電并預熱30分鐘;②設定儀器參數于光度測量方式、帶寬為2.0nm ;③按要求設定波長,校正99%基線;④選合適的濾光片放入樣品架,以空氣為參比一次測定,其透射比讀數即為被檢儀器在測試波長下的雜散光。
以上就幾種主要標準濾光片對分光光度計的波長準確度、波長重復性、透射比正確度、透射比重復性、雜散光等5個重要技術指標的檢定操作方法作了全面系統的介紹。并結合檢定規程就測量數據的處理做了必要的說明,以方便出具《檢定證書》。不同類型的分光光度計,均可根據相應的檢定規程在進行以上5個重要指標檢定時適用此方法。
