ELISA試劑盒和 血清使用方法及操作

                            ELISA試劑盒和 血清使用方法及操作

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品收集、處理及保存方法

1、 血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。

2、 血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。

3、 細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

4、 組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液

5、 保存------如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測(cè)前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

試劑的準(zhǔn)備

1． 標(biāo)準(zhǔn)品：標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋應(yīng)在實(shí)驗(yàn)時(shí)準(zhǔn)備，不能儲(chǔ)存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進(jìn)行：

240μg/L （5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品） 150ul的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

120μg/L （4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品） 150ul的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

60μg/L （3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品） 150ul的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

30μg/L （2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品） 150ul的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

15μg/L （1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品） 150ul的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

0μg/L （空白對(duì)照） 原始濃度不用稀釋直接加入50ul。

2． 洗滌緩沖液（50×）的稀釋：蒸餾水50倍稀釋。