elisa檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)條件的選擇包括

elisa檢測(cè)試劑盒使用時(shí)需留心的細(xì)節(jié)：
（1）不管是試劑盒，還是其它產(chǎn)品，在使用之前都要仔細(xì)閱讀說明書，同時(shí)確定試劑盒是不是在有效期內(nèi)。
（2）標(biāo)本制備要規(guī)范，每份標(biāo)本體積要按2-3個(gè)復(fù)孔以上的量制備（貯存），盡量分裝做備份，短期內(nèi)無法實(shí)驗(yàn)者，注意低溫保存。
（3）根據(jù)檢測(cè)標(biāo)本數(shù)量確定所需試劑盒的量。
（4）按說明書將所用試劑盒平衡至室溫，配制所需試劑盒，DIY夾心法ELISA常見技術(shù)指南。
（5）選擇抗體時(shí)選擇一個(gè)單抗和一個(gè)多抗進(jìn)行配對(duì)，若選擇兩個(gè)單抗，必須識(shí)別不同表位的抗體，從同一家公司選擇抗體。
（6）若使用過氧化物酶作為顯色系統(tǒng)，應(yīng)嚴(yán)禁在洗液和稀釋液中加疊氮鈉，疊氮鈉可抑制過氧化物酶的活性。
（7）當(dāng)測(cè)定混合液體中的抗原時(shí)，如血清，建議在標(biāo)本稀釋液中加不相干的Ig。
（8）準(zhǔn)備好所有實(shí)驗(yàn)額外所需物品，如試管、吸頭、移液器、離心機(jī)等。
實(shí)驗(yàn)條件的選擇包括:
（1）固相載體的選擇：不管何種載體，在使用前均可進(jìn)行篩選，用等量抗原包被，在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng)，觀察其顯色反應(yīng)是否均一性，據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
（2）包被抗體（或抗原）的選擇：將抗體（或抗原）吸附在固相載體表面時(shí)，要求純度要好，吸附時(shí)一般要求PH在9.0～9.6之間，吸附溫度，時(shí)間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18～24小時(shí)，
（3）酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇：首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價(jià)的滴定（見酶標(biāo)記抗體部份），然后再固定其它條件或采取“方陣法”（包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度）在正式實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。
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