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    凍干多肽的溶解詮釋

    時間:2023/8/17閱讀:317
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    凍干多肽的溶解:
    1、溶解多肽的*個原則是使用無菌蒸餾水或去離子水,應溶解在無菌的蒸餾水中或用0.45或0.2孔徑的濾膜過濾除菌。含有Cys、Met、Trp的多肽很容易氧化,應溶于無氧的水中,無氧水可通過注入惰性氣體(氮、氦、氬)減壓除氣得到;
    2、若多肽不溶于純水,超聲處理有助于打碎顆粒并增加溶解度。
    3、若多肽含有多個堿性氨基酸,使用(1-10%)的乙酸水溶液:對于疏水性強的多肽,應使用50%的乙酸;
    4、若多肽中含有大量酸性氨基酸,可用氨溶液(1-10%)或乙酸乙基ma 啡或重碳酸鹽等揮發性的堿性緩沖液溶解。
    5、異丙醇和乙腈能溶解中等大小的多肽。若肽要上柱,有機溶劑的量必須很少否則將嚴重影響停留時間;
    6、若多肽因含有Val、Leu、Met、Phe、Tyr、Ala等芳香鏈而高度疏水、或為中性肽時,DMF或DMSO等膜變性劑的使用,有利于多肽的溶解:
    a.高濃度模變性劑通過破壞多肽的二級結構而助溶;
    b.膜變性劑適于多肽分析液的制備,但可能會對其生物活性的研究工作造成干擾;
    c.DMF是變性劑(濃度可達30%),滴加至多肽溶解;
    d.反相層析法時,DMF將與洗脫液前鋒一起流出,根據入量的多少,峰值可能很高。大多數肽能在大量DMF流出后幾分鐘內流出,若肽鏈很小,洗脫太早,多肽的量將很低。

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