• <del id="qqie6"><sup id="qqie6"></sup></del>
  • <tfoot id="qqie6"></tfoot>
  • <ul id="qqie6"></ul>
  • 上海邦景實業有限公司
    初級會員 | 第8年

    13585886131

    elisa檢測試劑盒
    ATCC細胞
    菌種
    生化試劑
    生物抗體
    生物培養基
    酶聯免疫試劑盒
    PCR試劑盒
    elisa進口試劑盒
    核酸檢測試劑盒
    檢測試劑盒
    生化檢測試劑盒
    科研細胞
    標準品
    PCR檢測試劑盒
    溶液
    pcr相關試劑

    PCR反應引物的延伸

    時間:2022/8/15閱讀:2931
    分享:

    PCR反應引物的延伸:

          DNA模板-引物復合物在Taq DNA聚合酶的作用下,以dNTP為反應原料,靶序列為模板,按堿基配對與半保留復制原理,合成一條與模板DNA鏈互補的新鏈。引物延伸溫度的選擇取決于DNA聚合酶的最適溫度, 一般為70~75℃。延伸所需要的時間取決于模板DNA的長度。一般在72℃條件下,Taq DNA聚合酶催化的合成速度大約為40~60個堿基/秒,其速度取決于緩沖溶液的組成、ph值、鹽濃度與DNA模板的性質。

          PCR的三個反應步驟反復進行,使DNA擴增量呈指數上升。反應最終的DNA擴增量可用Y=(1+X)n計算。

          Y代表DNA片段擴增后的拷貝數,X表示平(Y)均每次的擴增效率,n代表循環次數。平均擴增效率的理論值為100%。反應初期,目的DNA片段的增加呈指數形式,隨著PCR產物的逐漸積累,被擴增的DNA片段不再呈指數增加,而進入線性增長期或靜止期,即出現“停滯效應",這種效應稱平臺效應。

    PCR擴增產物可分為長產物片段和短產物片段兩部分。引物如果跟原始DNA模板結合,從3'端開始擴增延伸,其產物的5'端是固定的,3'端則沒有固定的止點,長短不一,這就是“長產物片段"。引物如果是以新合成的DNA鏈(即“長產物片段")為模板擴增時,模板的5'端序列是固定位置的,即新合成延伸鏈的3'端是固定的,使新合成DNA鏈的起點和止點都限定于引物擴增序列以內、形成長短一致的“短產物片段"。由于新合成的DNA鏈在下一個循環反應中可以作為引物結合擴增的模板,“短產物片段"是按指數倍數增加。而原始DNA模版的量是固定的,“長產物片段"只按算術倍數增加,在最終PCR中的含量幾乎可以忽略不計。

        一般PCR反應包括上述變性-退火-延伸三個溫度點。但在擴增某些較短目標序列(長度為100~300bp時)時,可采用二溫度點法,即把退火與延伸溫度合二為一。



    會員登錄

    ×

    請輸入賬號

    請輸入密碼

    =

    請輸驗證碼

    收藏該商鋪

    X
    該信息已收藏!
    標簽:
    保存成功

    (空格分隔,最多3個,單個標簽最多10個字符)

    常用:

    提示

    X
    您的留言已提交成功!我們將在第一時間回復您~
    在線留言
    主站蜘蛛池模板: 国产成人精品免高潮在线观看| 欧美成人全部免费观看1314色| 亚洲欧美综合乱码精品成人网| 免费看一级淫片成人| 国产成人黄色小说| 国产成人A∨激情视频厨房| 久久成人无码国产免费播放| 天堂成人在线观看| 亚洲av成人精品网站在线播放| 欧美成人精品第一区| 天天摸夜夜摸成人免费视频| 亚洲av成人一区二区三区| 成人污视频在线观看| 亚洲国产成人久久一区二区三区| 成人综合激情另类小说| 久久精品成人欧美大片免费| 国产成人综合在线视频| 欧美成人另类人妖| 亚洲国产成人无码av在线播放| 成人免费无码大片A毛片抽搐| 久久久99精品成人片中文字幕| 国产成人精品一区二区三区免费| 欧美成人另类人妖| 久久成人a毛片免费观看网站| 国产精品成人亚洲| 成人欧美一区二区三区黑人3p| 1314成人网| 精品久久久久成人码免费动漫 | 国产成人精品免费视频大全麻豆 | 亚洲人成人77777网站| 国产成人a人亚洲精品无码| 成人动漫h在线观看| 欧美成人一区二区三区在线视频 | 在线观看免费成人| 国产成人精品视频一区| 外国成人网在线观看免费视频| 成人免费视频小说| 国产成人综合日韩精品无| 国产成人无码a区在线观看视频免费| 成人无码WWW免费视频| 成人深夜福利视频|