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    ELISA Kit 檢測操作步驟

    時間:2022/3/29閱讀:304
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    操作步驟:
    夾心法,一般的操作步驟為:
    將具有專一性的抗體固著于塑膠孔盤上,完成后洗去多余抗體;
    加入待測檢體,檢體中若含有待測的抗原,則其會與塑膠孔盤上的抗體進行專一性鍵結;
    洗去多余待測檢體,加入另一種對抗原專一的一次抗體,與待測抗原進行鍵結;
    洗去多余未鍵結一次抗體,加入帶有酶的二次抗體,與一次抗體鍵結;
    洗去多余未鍵結二次抗體,加入酶底物使酵素呈色,以肉眼或儀器讀取呈色結果;
    間接法,一般的操作步驟為:
    將已知的抗原固著于塑膠孔盤上,完成后洗去多余的抗原。
    加入待測檢體,檢體中若含有待測的一次抗體,則其會與塑膠孔盤上的抗原進行專一性鍵結。
    洗去多余待測檢體,加入帶有酶的二次抗體,與待測的一次抗體鍵結。
    洗去多余未鍵結二次抗體,加入酶底物使酶呈色,藉儀器測定塑膠盤中的吸光值,以評估有色終產物的含量即可測量待測抗體的含量。
    競爭法,其操作步驟為:
    將具有專一性的抗體固著于塑膠孔盤上,完成后洗去多余抗體
    加入待測檢體,使檢體中的待測抗原與塑膠孔盤上的抗體進行專一性鍵結
    加入帶有酶的抗原,此抗原也可與塑膠孔盤上的抗體進行專一性鍵結,由于塑膠孔盤上固著的抗體數量有限,因此當檢體中抗原的量越多,則帶有酶的抗原可鍵結的固著抗體就越少,亦即,兩種抗原皆競相與塑膠孔盤上抗體鍵結,即所謂競爭法之由來。

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