《飼料中維生素E的測定 高效液相色譜法》征求意見

　　【儀表網 行業標準】近日，由山東省飼料質量檢驗所 、四川威爾檢測技術股份有限公司 、中國農業科學院農業質量標準與檢測技術研究所[國家飼料質量監督檢驗中心(北京)] 、帝斯曼維生素(上海)有限公司等單位起草，TC76(全國飼料工業標準化技術委員會)歸口的國家標準計劃《飼料中維生素E的測定 高效液相色譜法》征求意見稿已編制完成，現公開征求意見。
 

　　天然存在的維生素 E 又稱生育酚，有 8 種形式，即α、β、γ、δ生育酚和α、β、γ、δ三烯生育酚，4 種生育酚和 4 種三烯生育酚統稱為維生素 E，都具有維生素 E 活性，其中α-生育酚的活性最高。維生素 E 的存在，能防止生物體內多種過氧化反應的發生，從而避免過氧化物的產生，保護好生物膜的結構和功能。維生素 E 和硒可協同發揮作用，防止肝組織壞死和肌肉受損。維生素 E 的應用，還能保護動物的繁殖機能，提高動物的免疫能力，促進免疫球蛋白的生成。由于未酯化的生育酚很快被空氣氧化變黑色，維生素 E 主要采用的形式是較穩定的α-生育酚乙酸酯形式。飼料添加劑品種目錄中規定的維生素 E 有三種：天然維生素 E、DL-α-生育酚、DL-α-生育酚乙酸酯，在飼料添加劑中主要以維生素 DL-α-生育酚乙酸酯的形式存在，分別為 DL-α-生育酚乙酸酯(粉)和 DL-α-生育酚乙酸酯(粉) CWS，含量均為 50%。前者生產工藝為維生素 E 油、二氧化硅攪拌混合，外觀為類白色或淡黃色粉末或顆粒狀粉末。后者生產工藝為維生素 E 油、辛烯基琥珀酸淀粉鈉乳化，噴霧干燥，外觀為白色或類白色流動性粉末。
 

　　在通常情況下，動物自身不能合成維生素 E 或合成量不能滿足正常生長需要，必須通過日糧提供。飼料中雖然含量很低，卻是必不可少的核心物質，因此維生素 E 是飼料質量控制的重要指標。另一方面，維生素 E 能夠在動物體內蓄積，長期超量就會產生有害影響。因此快速準確地測定飼料中維生素的含量對防止維生素缺乏癥、維生素中毒、維生素的穩定性以及制定合理的維生素加工工藝和儲存條件等具有重要意義。
 

　　本文件按照GB/T 1.1-2020《標準化工作導則 第1部分：標準化文件的結構和起草規則》的規定起草。
 

　　本文件代替 GB/T 17812-2008《飼料中維生素 E 的測定 高效液相色譜法》。與 GB/T 17812-2008 相比，除結構調整和編輯性改動外，主要技術變化如下：
 

　　a)第一法皂化提取法范圍增加了精料補充料，直接提取法范圍增加了復合預混合飼料(見第 1 章，2008 年版的第 1 章)；
 

　　b)第一法皂化提取法提取劑更改為石油醚(沸程 30℃-60℃)(見第 4 章，2008 年版第3 章)；
 

　　c)第一法中皂化提取法增加了維生素 E 標準系列溶液(見 4.2.16);
 

　　d)第一法中皂化提取法配合飼料、精料補充料、濃縮飼料樣品制備方法更改為試樣全部通過 1 mm 孔篩，復合預混合飼料試樣、維生素預混合飼料更改試樣裝入密閉容器，盡快測定(見 4.4，2008 年版中 3.5);
 

　　e)增加了固相萃取法(見 4.5.1.2.2)及其色譜圖；
 

　　f)增加了液相色譜參考條件(見 4.5.2.2)；
 

　　g)增加了定性檢測方法，定量檢測增加多點校正(見第 4 章);
 

　　h)刪除了正相色譜條件(2008 年版第 3 章);
 

　　i)更改了第一法皂化提取法中試驗數據處理(見 4.6，2008 年版的 3.6.2.3)
 

　　j)增加了第二法直接提取法中維生素 E 標準系列溶液(見 5.2.5)；
 

　　k)更改了第二法直接提取法中試驗數據處理(見 5.6，2008 年版的 4.6.2.3)
 

　　l)增加第一法皂化法提取法維生素 E 標準溶液的液相色譜圖(見附錄 A)，增加第二法直接提取法 dl-α-生育酚乙酸酯的液相色譜圖(見附錄 B)。
 

　　本文件描述了飼料中維生素E的高效液相色譜測定方法。本文件中“第一法 皂化提取法”適用于配合飼料、濃縮飼料、精料補充料、復合預混合飼料和維生素預混合飼料中維生素 E(dl-α-生育酚)的測定，“第二法 直接提取法”適用于維生素預混合飼料、復合預混合飼料中維生素 E(dl-α-生育酚乙酸酯)的測定。
 

　　本文件“第一法 皂化提取法”的定量限為1mg/kg，“第二法 直接提取法”的定量限為20mg/kg。
 

　　第一法 皂化提取法
 

　　原理：
 

　　試樣用堿溶液皂化后，經液液萃取或固相萃取凈化后，用高效液相色譜儀分離測定，外標法定量。
 

　　儀器和設備：
 

　　1.高效液相色譜儀：配有紫外吸收檢測器(或二極管矩陣檢測器)；
 

　　2.分析天平：精度為0.01mg 和0.1mg。
 

　　3.回流裝置：圓底燒瓶和冷凝管。
 

　　4.恒溫水浴，控溫精度 ± 2 ℃。
 

　　5.旋轉蒸發儀。
 

　　6.離心機：轉速不低于 10 000 r/min。
 

　　7.固相萃取裝置。
 

　　8.氮吹儀：帶加熱裝置，溫度可控制在(50±2)℃。
 

　　9.渦旋混合器。
 

　　第二法 直接提取法
 

　　原理：
 

　　維生素預混合飼料、復合預混合飼料中維生素 E(dl-α-生育酚乙酸酯)用甲醇溶液提取，試液注入高效液相色譜色譜柱，用紫外檢測器(或二極管陣列檢測器)在285nm 處測定，外標法計算維生素 E(dl-α-生育酚乙酸酯)含量。
 

　　儀器設備：
 

　　1.高效液相色譜儀：配有二極管矩陣檢測器或紫外檢測器。
 

　　2.分析天平，精度為0.0001g 和0.00001g。
 

　　3.超聲波清洗器：頻率不低于35000Hz。
 

　　維生素 E 是飼料質量控制的重要指標。修訂飼料中維生素 E 測定國家標準方法，對于規范飼料原料生產，提高產品質量和安全水平，加強飼料質量安全監管，保障我國畜產品質量安全，確保人民身體健康，推動畜牧產業和畜牧業經濟快速健康發展，有十分重要的意義。
 

　　更多詳情請見附件。