Axopatch 200B 是 Axon Instruments 膜片鉗放大器的新版本，采用創(chuàng)新的電容器反饋技術(shù)進(jìn)行單通道記錄，電阻反饋技術(shù)用于全細(xì)胞記錄，為單通道和全細(xì)胞記錄提供很好的性能-細(xì)胞膜片鉗。方便的功能包括 ZAP（在整個(gè)電池中破壞貼片）、雙速電流鉗（允許在小電池中更快地鉗位電流）、保持命令（用于在電壓鉗中設(shè)置電壓命令和在電流鉗中設(shè)置電流命令），以及選擇專(zhuān)用電流輸出上的三個(gè)增益設(shè)置（用于貼片、全細(xì)胞和松散貼片模式）。Axopatch 200B 提供噪音的單通道錄音。0.13 pA rms (10 kHz) 的驚人低開(kāi)路噪聲增加到僅 0。當(dāng)貼片移液器支架連接到探頭輸入端并且移液器電容得到補(bǔ)償（以消除電容充電瞬態(tài)）時(shí)，為 145 pA rms。電容反饋技術(shù)的功率如下圖（圖1）：室溫下電容反饋明顯優(yōu)于電阻反饋技術(shù)；冷卻電容反饋更好！
用于人工
雙層實(shí)驗(yàn)的雙層探頭必須在大輸入電容負(fù)載下保持穩(wěn)定。Axopatch 200B 是堅(jiān)如磐石的，輸入電容為 1000 pF。此外，Axopatch 200B 中的集成技術(shù)使雙層電壓能夠非常快速地步進(jìn)。有兩個(gè)原因。首先，積分器具有固有的大動(dòng)態(tài)范圍，允許它瞬時(shí)通過(guò)幾微安的電流。其次，在大指令電壓階躍期間，積分器進(jìn)入復(fù)位狀態(tài)。在這種狀態(tài)下，探頭繼續(xù)作為電壓鉗放大器工作，但反饋電阻非常低。在積分器處于復(fù)位狀態(tài)的幾毫秒內(nèi)，它可以通過(guò)高達(dá) 1 mA 的電流為雙層電容快速充電。
全細(xì)胞性能
電阻式探頭模式
在全細(xì)胞記錄中，細(xì)胞和環(huán)境產(chǎn)生的電流噪聲比膜片鉗放大器產(chǎn)生的電流更大。因此，低噪聲電容反饋探頭的優(yōu)勢(shì)無(wú)法在全細(xì)胞模式下得到有效利用。出于這個(gè)原因，Axopatch 200B 使用傳統(tǒng)的電阻反饋探頭電子設(shè)備進(jìn)行膜片鉗記錄的全細(xì)胞模式。CV 203BU 探頭包括兩個(gè)反饋電阻器，可在全電池模式下提供廣泛的電流通過(guò)能力。500 兆歐反饋電阻 (?=1) 提供低噪聲和大電流通過(guò)能力 (20 nA)。對(duì)于更大的電流，可以切換到 50 兆歐反饋電阻器 (?=0.1) 以傳遞高達(dá) 200 nA 的電流。
串聯(lián)電阻補(bǔ)償 串聯(lián)電阻補(bǔ)償
有兩個(gè)目標(biāo)，預(yù)測(cè)和校正。
串聯(lián)電阻預(yù)測(cè)
通過(guò)瞬時(shí)增加指令電壓階躍的大小（“增壓”），使膜電位盡可能快地達(dá)到其指定值。
串聯(lián)電阻校正
為了消除由于電極上的電壓降引起的誤差并提高記錄的帶寬，通過(guò)將與測(cè)量電流成比例的信號(hào)添加到探頭的命令輸入來(lái)應(yīng)用正反饋以增加命令電位。串聯(lián)電阻預(yù)測(cè)和校正可在 Axopatch 200B 上一起或單獨(dú)使用。
雙速電流鉗
Axopatch 200B 采用雙速電流鉗來(lái)優(yōu)化速度和穩(wěn)定性。速度的選擇取決于移液器的阻力。對(duì)于超過(guò) 10 兆歐的移液器電阻，可以使用 I-Clamp FAST 模式在許多實(shí)驗(yàn)條件下獲得 10 µs 的上升時(shí)間。I-Clamp NORMAL 模式可確保任何超過(guò) 1 兆歐的移液器電阻的穩(wěn)定性。此外，可以使用電流鉗到零電流（I=0 模式），以及較慢的鉗到零電流（跟蹤模式），用于在密封形成之前接近細(xì)胞時(shí)跟蹤移液器偏移的緩慢變化。此外，Axopatch 200B 包括在電流鉗中的串聯(lián)電阻補(bǔ)償，允許校正由于移液器電阻引起的電壓誤差。
電容反饋膜片鉗
Axopatch 200B 提供噪聲的膜片鉗放大器技術(shù)。貼片模式下的開(kāi)路（放大器）噪聲已降至低水平：1 kHz 帶寬以下 < 15 femtoAmps (rms)、5 kHz 帶寬以下 < 60 femtoAmps (rms) 和 10 以下 < 130 femtoAmps (rms) kHz 帶寬，均使用 8 極貝塞爾濾波器測(cè)量。安裝了移液器支架后，噪音仍然很低（10 kHz 帶寬以下 145 femtoAmps rms）。這意味著在實(shí)際錄音過(guò)程中噪音更低；這種噪聲性能部分是通過(guò)將探頭內(nèi)部的輸入場(chǎng)效應(yīng)晶體管冷卻到遠(yuǎn)低于 0°C 來(lái)實(shí)現(xiàn)的。
更好的噪音性能只是故事的一部分。重新設(shè)計(jì)的超薄探頭通過(guò)使其更容易安裝在顯微鏡下，改善了電極對(duì)準(zhǔn)備工作的訪(fǎng)問(wèn)。我們現(xiàn)在在一個(gè)探頭中包含兩個(gè)全細(xì)胞范圍（以前僅在兩個(gè)單獨(dú)的探頭中可用）。
包括
Axopatch 200B 隨附以下物品：
Axopatch 200B 放大器
CV-203BU 探頭（部件號(hào) 1-CV 203BU）
美國(guó)電源線(xiàn)（部件號(hào) 1-3010-0011）
歐洲電源線(xiàn)，CEE7/7（部件號(hào) 1-3010-0013）
附件套件（部件號(hào) 1-2050-0301）包含：ACC 保險(xiǎn)絲（部件號(hào) 1-2050-0014）、用于將探頭連接到機(jī)械手的底板（部件號(hào) 1-5200-0100）、電極支架（部件號(hào) 1-HL-U )、串聯(lián)電阻抖動(dòng)盒（部件號(hào) 1-DR-1）、Patch-1U 型號(hào)單元（部件號(hào) 1-PATCH-1U）、手冊(cè)（部件號(hào) 1-2500-0121）
移液器偏移
Axopatch 200B 提供 ±250 mV 的偏移電位。
密封測(cè)試
方便的密封測(cè)試可用于電壓鉗模式（5 mV 脈沖）或電流鉗模式（50 pA (?=1) 或 500 pA (?=0.1)）。
雙指令電位
兩個(gè)獨(dú)立的指令電位輸入允許您將來(lái)自?xún)蓚€(gè)不同來(lái)源的指令輸入信號(hào)相加。后面板命令被縮放以提供更大的范圍（高達(dá)±1V），因此對(duì)于電化學(xué)測(cè)量非常有用。
保持命令
Axopatch 200B 的保持命令比其前代產(chǎn)品有所增強(qiáng)，增加了一個(gè) X1 和 X5 開(kāi)關(guān)，允許您選擇 0 – 200 mV 或 0 -1 V 范圍。當(dāng)使用來(lái)自計(jì)算機(jī)的外部命令來(lái)建立保持電位時(shí)，ON/OFF 開(kāi)關(guān)可以禁用此控制。
移液器電容補(bǔ)償
在電壓鉗或電流鉗模式下操作時(shí)，控制兩個(gè)時(shí)間常數(shù) Fast 和 Slow 的幅度和 tau。
Cell Capacitance Compensation
補(bǔ)償高達(dá) 100 pF (?=1) 或 1000 pF (?=0.1) 以允許從大范圍的單元尺寸進(jìn)行記錄。
輸出增益
可以選擇跨越 1000 倍范圍的十個(gè)增益設(shè)置，以將輸出縮放到理想的水平。
泄漏減法
Axopatch 200B 允許您糾正出現(xiàn)的泄漏錯(cuò)誤，而無(wú)需調(diào)整數(shù)據(jù)采集軟件設(shè)置。
低通
濾波器 具有從 1 kHz 到 100kHz 的五種設(shè)置的 4 極貝塞爾濾波器允許您在比以前可用的兩倍范圍內(nèi)設(shè)置適合您應(yīng)用的帶通。
面板儀表
報(bào)告任何操作模式下的電流、電壓或探頭溫度值。報(bào)告穩(wěn)態(tài)電流以監(jiān)測(cè)電壓鉗輸出。為了評(píng)估噪聲，電流顯示為 RMS 值。
Zap
Axopatch 200B 通過(guò)在選定的持續(xù)時(shí)間內(nèi)施加單個(gè) +1.3V 脈沖來(lái)促進(jìn)貼片破裂。
移液器支架
提供兩個(gè)不同長(zhǎng)度的 HL-U 支架，可容納 1.0 毫米至 1.7 毫米外徑的移液器。
