原代小鼠骨髓來源內(nèi)皮祖細(xì)胞
英文名稱 | Mouse Bone Marrow-Derived Endothelial Progenitor Cells | 組織來源 | 骨髓 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 細(xì)胞形態(tài) | 內(nèi)皮細(xì)胞樣 |
生長特性 | 貼壁 | 貨號 | GOY-01X1119 |
包被條件 PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）
培養(yǎng)基 含F(xiàn)BS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳1-2代；不建議多次傳代
消化液 0.25%yi蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
小鼠骨髓來源內(nèi)皮祖分離自骨髓；骨髓是機(jī)體的造血組織，位于身體的許多骨骼內(nèi)。成年動物的骨髓分兩種：紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細(xì)胞、血小板和各種白細(xì)胞。血小板有止血作用，白細(xì)胞能殺滅與抑制各種病原體，包括細(xì)菌、病毒等；某些淋巴細(xì)胞能制造抗體。因此，骨髓不但是造血器官，它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨（如肱骨、股骨）的骨髓腔和扁平骨（如髂骨）的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中，是一種海綿狀的組織，能產(chǎn)生血細(xì)胞的骨髓略呈紅色，稱為紅骨髓。出生時，紅骨髓充滿全身骨髓腔，隨著年齡增大，脂肪細(xì)胞增多，相當(dāng)部分紅骨髓被黃骨髓取代，最后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。內(nèi)皮祖細(xì)胞是血管內(nèi)皮細(xì)胞的前體細(xì)胞，亦稱為成血管細(xì)胞（Angioblast），是一群具有游走特性，能進(jìn)一步增殖分化的幼稚內(nèi)皮細(xì)胞，缺乏成熟內(nèi)皮細(xì)胞的特征性表型，不能形成管腔樣結(jié)構(gòu)，其功能主要為參與了出生后缺血組織的血管發(fā)生和血管損傷后的修復(fù)。研究顯示，內(nèi)皮祖細(xì)胞在心腦血管疾病、外周血管疾病、腫瘤血管形成及創(chuàng)傷愈合等方面均發(fā)揮重要作用，并為缺血性疾病的研究治療提供了新思路，EPCs生物學(xué)特性和治療作用的研究成為這一領(lǐng)域新的熱點(diǎn)。 |
方法簡介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠骨髓來源內(nèi)皮祖采用沖洗骨髓、密度梯度離心、差速貼壁法結(jié)合內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠骨髓來源內(nèi)皮祖經(jīng)CD34免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
1. 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶（或皿）中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。
2. 消化培養(yǎng)法
組織消化法是把組織剪切成較小團(tuán)塊（或糊狀），應(yīng)用酶的生化作用和 非酶的化學(xué)作用進(jìn)一步使細(xì)胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動，使團(tuán)塊膨松，由塊狀 變成 絮狀，此時再采用機(jī)械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠 瓶中振蕩，使細(xì)胞團(tuán)塊得以較充分的分散，制成少量細(xì)胞群團(tuán)和大量單個細(xì)胞的細(xì)胞懸液，接種培養(yǎng)后，細(xì)胞容易貼壁生長。
3. 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
4. 器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
1. 取材的組織要盡快培養(yǎng)。如若不能及時培養(yǎng)，可將組織浸泡于培養(yǎng)液內(nèi)，放置于冰浴或4℃冰箱中，如果組織塊很大，應(yīng)切成1cm3以下的小塊再低溫保存，但時間不能超過24h。
2. 從消化道、周圍有壞死組織等污染因素存在的區(qū)域取材，可用含500～1000u/ml的青BSS液漂洗5～10min，或用10%注射液沖洗浸泡10min再作培養(yǎng)。
3. 組織塊不易貼壁，可預(yù)先在瓶壁涂薄層血清、胎汁或鼠尾膠原等。
4. 原代培養(yǎng)的1～2d內(nèi)要特別注意觀察是否有細(xì)菌、真菌、霉菌的污染，一旦發(fā)現(xiàn)，要及時清除。
人肺腺癌細(xì)胞；SPC-A1 | 人肺癌細(xì)胞/5Fu耐藥株；A549-5Fu |
人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞；DMS153 | 人副流感病毒3型染料法熒光定量RT-PCR試劑盒 |
人乳腺癌細(xì)胞（上皮粘性蛋白基因修飾）；Ecad231-7 | 人副流感病毒2型染料法熒光定量RT-PCR試劑盒 |
人乳腺癌細(xì)胞（上皮粘性蛋白基因修飾）；Ecad231-9 | 人副流感病毒通用染料法熒光定量RT-PCR試劑盒 |
綠色熒光蛋白標(biāo)記人結(jié)直腸癌細(xì)胞；HCT116-GFP | 人副流感病毒1型染料法熒光定量RT-PCR試劑盒 |
人乳腺癌細(xì)胞（綠色熒光蛋白標(biāo)記）；MDA-MB-231-GFP | 人多瘤病毒9 染料法熒光定量PCR試劑盒 |
人乳腺癌細(xì)胞（紅色熒光蛋白標(biāo)記）；MDA-MB-231-Red3 | 人多瘤病毒7 染料法熒光定量PCR試劑盒 |
小鼠大隱靜脈內(nèi)皮細(xì)胞 | 人多瘤病毒6 染料法熒光定量PCR試劑盒 |
人乳腺癌細(xì)胞（穩(wěn)轉(zhuǎn)pTet-on質(zhì)粒）；MDA-MB-231-B2 | 人副流感病毒4A型染料法熒光定量RT-PCR試劑盒 |
人慢性髓系白血病細(xì)胞（白介21基因修飾）；K562/IL21 | 人副流感病毒4B型染料法熒光定量RT-PCR試劑盒 |
人慢性髓系白血病細(xì)胞（白介15基因修飾）；K562/IL15 | 人冠狀病毒通用染料法熒光定量RT-PCR試劑盒 |
人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞（白介21基因修飾）；RPMI-8226/IL21 | 人冠狀病毒229E 染料法熒光定量RT-PCR試劑盒 |
人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞（白介15基因修飾）；RPMI-8226/IL15 | 原代小鼠骨髓來源內(nèi)皮祖細(xì)胞人冠狀病毒HKU 染料法熒光定量RT-PCR試劑盒 |
人急性單核細(xì)胞白血病細(xì)胞（白介21基因修飾）；THP-1/IL21 | 人冠狀病毒NL63 染料法熒光定量RT-PCR試劑盒 |
哈維弧菌/副溶血性弧菌雙重檢測試劑盒（PCR-熒光探針法） | 人冠狀病毒OC43染料法熒光定量RT-PCR試劑盒 |
