產(chǎn)品名稱 | 原代大鼠脊髓神經(jīng)干細(xì)胞 | 英文名稱 | Rat Spinal Cord Neural Stem Cells |
規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 貨號 | GOY-01X1407 |
組織來源 | 脊髓組織 | 細(xì)胞形態(tài) | 球形 |
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含B-27 Supplement、EGF、bFGF、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 懸浮
細(xì)胞形態(tài) 球形
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%yi蛋白酶，Accutase
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細(xì)胞簡介：
大鼠脊髓神經(jīng)干分離自脊髓組織；脊髓是細(xì)細(xì)的管束狀的神經(jīng)結(jié)構(gòu)，位于脊柱的椎管內(nèi)且被脊椎保護；是源自腦的中樞神經(jīng)系統(tǒng)延伸部分。中樞神經(jīng)系統(tǒng)的細(xì)胞依靠復(fù)雜的聯(lián)系來處理傳遞信息。脊髓的主要功能是傳送腦與外周之間的神經(jīng)信息。人和脊椎動物中樞神經(jīng)系統(tǒng)的一部分，在椎管里面，上端連接延髓，兩旁發(fā)出成對的神經(jīng)，分布到四肢、體壁和內(nèi)臟。脊髓的內(nèi)部有一個H形（蝴蝶型）灰質(zhì)區(qū)，主要由神經(jīng)細(xì)胞構(gòu)成；在灰質(zhì)區(qū)周圍為白質(zhì)區(qū)，主要由有髓神經(jīng)纖維組成；脊髓是許多簡單反射的中樞。脊髓兩旁發(fā)出許多成對的神經(jīng)（稱為脊神經(jīng)）分布到全身皮膚、肌肉和內(nèi)臟器官。脊髓是周圍神經(jīng)與腦之間的通路，也是許多簡單反射活動的低級中樞。按脊神經(jīng)的出入可把脊髓也分為相應(yīng)的31節(jié)，31對脊神經(jīng)就是由不同的脊椎發(fā)出的。神經(jīng)干細(xì)胞是一類具有分裂潛能和自更新能力的母細(xì)胞，它可以通過不對等的分裂方式產(chǎn)生神經(jīng)組織的各類細(xì)胞。需要強調(diào)的是，在腦脊髓等所有神經(jīng)組織中，不同的神經(jīng)干細(xì)胞類型產(chǎn)生的子代細(xì)胞種類不同，分布也不同。神經(jīng)干細(xì)胞作為干細(xì)胞的一種，它具有其它所有干細(xì)胞的基本特征：具有自我維持和自我更新能力，具有多種分化潛能，具有分化為本系統(tǒng)大部分類型細(xì)胞的能力，這種自我更新和分化潛能可以維持相當(dāng)長的時間甚至終生，對損傷和疾病具有反應(yīng)能力。神經(jīng)干細(xì)胞在疾病、損傷狀態(tài)下具有增殖、遷移，并向神經(jīng)細(xì)胞、星形膠質(zhì)細(xì)胞和少突膠質(zhì)細(xì)胞分化的能力，已成為神經(jīng)系統(tǒng)損傷修復(fù)和再生研究的熱點，體外建立穩(wěn)定的神經(jīng)干細(xì)胞培養(yǎng)模型是其基礎(chǔ)和臨床應(yīng)用的前提。神經(jīng)干細(xì)胞在培養(yǎng)3-4d后，可形成神經(jīng)球，神經(jīng)球在培養(yǎng)基中呈懸浮生長。
方法簡介：
公司實驗室分離的大鼠脊髓神經(jīng)干采用yi蛋白酶消化后差速貼壁，結(jié)合神經(jīng)干細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
公司實驗室分離的大鼠脊髓神經(jīng)干經(jīng)Nestin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
1) 將5-10d的乳鼠浸泡入75%乙醇中，移入生物安全柜，
2) 從胸部解剖乳鼠，取出雙肺置于預(yù)冷的PBS中，盡可能的除去結(jié)締組織等，
3) 取肺邊緣部分，剪碎，將組織塊移入T25培養(yǎng)瓶中，倒置于細(xì)胞培養(yǎng)箱中，
4) 2h后，培養(yǎng)瓶中注入2 mL內(nèi)皮培養(yǎng)基，小心將培養(yǎng)瓶正置于培養(yǎng)箱，確保組織塊不會飄起來，
5) 每3d換液2mL，待細(xì)胞從組織塊中爬出來后，隔2d換液，待細(xì)胞融合達(dá)到60-70%左右時，去除組織塊，將肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞重新鋪瓶。
小鼠神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞；Neuro-2a[N2a;Neuro-2a] | 人腎癌細(xì)胞；OS-RC-2 |
人惡性胚胎橫紋肌瘤細(xì)胞；RD | 甲型肝炎病毒(HAV)核酸檢測試劑盒 |
人結(jié)腸腺癌細(xì)胞；LS180(CL-187)[LS180] | 腸道病毒EV71型(EV-71)核酸檢測試劑盒 |
人膀胱移行細(xì)胞癌細(xì)胞；T24 | 人星狀病毒(HastV)核酸檢測試劑盒 |
小鼠正常肝細(xì)胞；NCTC1469[NCTC1469] | 心病毒(SAFV)核酸檢測試劑盒 |
人舌鱗癌細(xì)胞；Tca-8113[Tca8113] | 柯薩奇病毒CA16型(CAV-16)核酸檢測試劑盒 |
正常小鼠睪丸Leydig細(xì)胞；TM3 | 呼吸道合胞病毒A 型（RSV-A）核酸檢測試劑盒 |
大鼠氣管上皮細(xì)胞；RTE | 呼吸道合胞病毒B 型（RSV-B）核酸檢測試劑盒 |
人子宮頸鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞；SiHa | 埃博拉病毒(EBOV)核酸檢測試劑盒 |
293來源病毒包裝細(xì)胞；ΦA-GP | 肺炎支原體(MP)核酸檢測試劑盒 |
293來源病毒包裝細(xì)胞；ΦA | 廣州管圓線蟲(AC)核酸檢測試劑盒 |
615小鼠T細(xì)胞性白血病瘤株；L7712 | 異尖線蟲(Ani)核酸檢測試劑盒 |
615小鼠乳腺癌瘤株；Ca759 | 原代大鼠脊髓神經(jīng)干細(xì)胞單純皰疹病毒(HSV)核酸檢測試劑盒 |
615小鼠滑膜肉瘤瘤株；ZM755 | 人皰疹病毒(HHV)核酸檢測試劑盒 |
Bt基因檢測試劑盒（PCR-熒光探針法） | 鉤端螺旋體(Lep)核酸檢測試劑盒 |
1、您收到細(xì)胞后，請按照以下方法進行操作：
取出T-25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精擦拭培養(yǎng)瓶，拆下封口膜，放入37℃，5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置4-6小時或過夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)，然后換用新鮮培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)或進行傳代。
2、細(xì)胞傳代：
1）細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時，棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2）添加0.125%消化液約2ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后加入培養(yǎng)液終止消化，再輕輕吹打細(xì)胞使之脫落，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，1500rpm/min，離心5min；
3）棄上清，沉淀細(xì)胞用12ml培養(yǎng)基重懸，然后按1:2比例進行分瓶傳代，放入37℃，5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4）待細(xì)胞貼壁后，觀察培養(yǎng)結(jié)果，之后進行換液培養(yǎng)或傳代。
3、細(xì)胞凍存：
1）細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時，棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2）添加0.125%消化液約2ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后輕輕吹打細(xì)胞使之脫落，再加入培養(yǎng)液終止消化，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，1500rpm/min，離心5min；
3）用適當(dāng)量的凍存液（基礎(chǔ)培養(yǎng)基：FBS：DMSO=7:2:1）重懸細(xì)胞，并放置于凍存管中；
4）先將細(xì)胞凍存管放置于-20℃ 1.5h，然后將其移入-80℃過夜，24h后轉(zhuǎn)入液氮中進行長期保存。
4、細(xì)胞復(fù)蘇：
1）從液氮中取出細(xì)胞凍存管（注意：佩戴防爆管面具）， 快速將其置入37℃水浴中解凍，直至凍存管中無結(jié)晶，然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁；
2）將凍存管中的細(xì)胞移至15ml無菌離心管中，滴加入培養(yǎng)液5ml混勻細(xì)胞，然后將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至適當(dāng)面積大小的培養(yǎng)皿中；
3）放置于37℃，5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4）第二天，換用新鮮培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
