產品名稱 | 原代大鼠肝動脈平滑肌細胞 | 英文名稱 | Rat Hepatic Artery Smooth Muscle Cells |
規格 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | 貨號 | GOY-01X0823 |
組織來源 | 肝動脈組織 | 細胞形態 | 成纖維細胞樣 |
培養信息：
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右；3代以內狀態最佳
消化液 0.25%yi蛋白酶
培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞簡介：
大鼠肝動脈平滑肌分離自肝動脈組織；在胚胎期，肝臟有3條動脈供血，分別來源于胃左動脈、腹腔動脈和腸系膜上動脈，這3條動脈分別肝臟的不同部位。出生后，一般保留一條動脈，大部分為起源于腹腔動脈的動脈，由其分出左、右肝動脈供應左、右半肝。偶爾也可見起源于胃左動脈的動脈或起源于腸系膜上動脈的動脈。但也有2條動脈并存的情況，如起源于腹腔動脈和起源于胃左動脈（25%），起源于腹腔動脈和起源于腸系臘上動脈（10%），而起源于胃左動脈和起源于腸系膜上動脈的2條動脈同時存在的情況比較少見。此外，還有5%像胚胎期一樣，3條動脈同時存在。這種起源于腹腔動脈以外的肝動脈稱為迷走肝動脈，如果肝臟沒有起源于腹腔動脈的動脈供血時，此種異位起源的肝動脈稱替代動脈，如果在常見肝動脈類型外，還有一支這種異位起始的動脈肝臟的一部分血流，這種肝動脈稱副肝動脈。肝動脈平滑肌細胞是肝動脈的重要結構細胞之一，在機體的正常生理過程中發揮著重要作用。肝動脈平滑肌細胞原代分離培養3天后，可見細胞貼壁伸展，細胞形態大小不一，呈梭形、不規則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細胞匯合，多數細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長，高低起伏；細胞密度低時，常交織成網狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態學特征和生長特點。血管平滑肌細胞的加速生長潛能是血管疾病進展的關鍵因素，最新研究表明血管平滑肌細胞表達的ICAM-1和VCAM-1能促進血管壁的炎癥反應，并且與血管疾病的發展及穩定性有關。
方法簡介：
公司實驗室分離的大鼠肝動脈平滑肌采用yi蛋白酶-膠原酶聯合消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測：
公司實驗室分離的大鼠肝動脈平滑肌經α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1、您收到細胞后，請按照以下方法進行操作：
取出T-25cm2培養瓶，75%酒精擦拭培養瓶，拆下封口膜，放入37℃，5%CO2細胞培養箱中靜置4-6小時或過夜，以穩定細胞狀態，然后換用新鮮培養液繼續培養或進行傳代。
2、細胞傳代：
1）細胞生長至覆蓋培養瓶的80%面積時，棄25cm2培養瓶中的培養液，用PBS清洗細胞一次；
2）添加0.125%消化液約2ml至培養瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后加入培養液終止消化，再輕輕吹打細胞使之脫落，然后將懸液轉移至15ml離心管中，1500rpm/min，離心5min；
3）棄上清，沉淀細胞用12ml培養基重懸，然后按1:2比例進行分瓶傳代，放入37℃，5%CO2細胞培養箱中培養；
4）待細胞貼壁后，觀察培養結果，之后進行換液培養或傳代。
3、細胞凍存：
1）細胞生長至覆蓋培養瓶的80%面積時，棄25cm2培養瓶中的培養液，用PBS清洗細胞一次；
2）添加0.125%消化液約2ml至培養瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后輕輕吹打細胞使之脫落，再加入培養液終止消化，然后將懸液轉移至15ml離心管中，1500rpm/min，離心5min；
3）用適當量的凍存液（基礎培養基：FBS：DMSO=7:2:1）重懸細胞，并放置于凍存管中；
4）先將細胞凍存管放置于-20℃ 1.5h，然后將其移入-80℃過夜，24h后轉入液氮中進行長期保存。
4、細胞復蘇：
1）從液氮中取出細胞凍存管（注意：佩戴防爆管面具）， 快速將其置入37℃水浴中解凍，直至凍存管中無結晶，然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁；
2）將凍存管中的細胞移至15ml無菌離心管中，滴加入培養液5ml混勻細胞，然后將細胞懸液轉移至適當面積大小的培養皿中；
3）放置于37℃，5%CO2細胞培養箱中培養；
4）第二天，換用新鮮培養基繼續培養。
小鼠雜交瘤細胞；4D2 | 小鼠雜交瘤細胞；3H11G12C8D6 |
小鼠雜交瘤細胞；2F1 | 折光馬爾太蟲PCR檢測試劑盒 |
小鼠雜交瘤細胞；3H8H6B1D1 | 悉尼馬爾太蟲PCR檢測試劑盒 |
小鼠雜交瘤細胞；1C7C1E7B9 | 蜂房蜜蜂球菌PCR檢測試劑盒 |
小鼠雜交瘤細胞；4D3 | 麻疹病毒PCR檢測試劑盒 |
小鼠雜交瘤細胞；2C8G10D6F9 | 同豬嵴病毒梅拉哥病毒PCR檢測試劑盒 |
小鼠雜交瘤細胞；3E11F1D8F9 | 梅克爾多元癌細胞病毒PCR檢測試劑盒 |
前B淋巴細胞 | 肺炎病毒PCR檢測試劑盒 |
小鼠雜交瘤細胞；2B2F1E6G3 | 馬立克氏病病毒PCR檢測試劑盒 |
小鼠雜交瘤細胞；1D5H12F1A7 | 馬立克氏病病毒3型PCR檢測試劑盒 |
小鼠雜交瘤細胞；1H7G10D10F7 | 馬立克氏病病毒2型PCR檢測試劑盒 |
小鼠雜交瘤細胞；IIID12 | 馬立克氏病病毒1型PCR檢測試劑盒 |
小鼠雜交瘤細胞；3B10 | 原代大鼠肝動脈平滑肌細胞反芻獸曼氏桿菌PCR檢測試劑盒 |
小鼠雜交瘤細胞；1C9H6F2C1 | 痢疾桿菌PCR檢測試劑盒（熒光PCR法） |
曼氏裂頭蚴檢測試劑盒 | 馬鼻疽桿菌PCR檢測試劑盒 |
1) 將5-10d的乳鼠浸泡入75%乙醇中，移入生物安全柜，
2) 從胸部解剖乳鼠，取出雙肺置于預冷的PBS中，盡可能的除去結締組織等，
3) 取肺邊緣部分，剪碎，將組織塊移入T25培養瓶中，倒置于細胞培養箱中，
4) 2h后，培養瓶中注入2 mL內皮培養基，小心將培養瓶正置于培養箱，確保組織塊不會飄起來，
5) 每3d換液2mL，待細胞從組織塊中爬出來后，隔2d換液，待細胞融合達到60-70%左右時，去除組織塊，將肺微血管內皮細胞重新鋪瓶。
