Trypsin-EDTA 0.25%（含酚紅）2

（Trypsin-EDTA 0.25%）（含酚紅） 

     貨號          規(guī)格         備注 

BDXB0020-1  100ml      1× 

保存溫度：-20℃ 

   （Trypsin-EDTA）是常用的細胞分離試劑，為223個氨基酸組成的單鏈多肽，是原（Trypsinogen）在Lys6和Ile7之間切除氨基N末端6肽（Hexapeptide）得到的。屬于水解酶家族，活化位點包括His46和Ser183，裂解Lysine的羧基末端和 Arginine的氨基末端，水解效率在任何一端存在酸性氨基酸時降低，而當Proline存在于裂解 位點的羧基末端一側(cè)時，水解反應(yīng)不能發(fā)生。的使用pH值為7.2-9.2。

 成分 貨號 BDXB0020-1 0.25% EDTA·4Na 0.02g/L 酚紅 N/A 

操作步驟 

注：使用前將解凍，保存在4℃，建議不要反復(fù)凍融。 

1. 移除細胞培養(yǎng)瓶/皿中的培養(yǎng)液，用適量不含鈣和鎂離子的PBS或D-PBS快速沖洗細胞 1-2次，移除培養(yǎng)瓶/皿中的液體；

 2. 加入適量（10cm培養(yǎng)皿加入0.5ml），轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶/皿，讓細胞和充分接觸；

 3. 置于37℃培養(yǎng)箱中，孵育1-5min（不同細胞類型有所不同）； 

4. 輕輕磕擊培養(yǎng)瓶/皿，在倒置顯微鏡下觀察，大多數(shù)細胞熒光橙懸浮狀態(tài)； 

5. 加入培養(yǎng)基，用移液管吹打5-10次，按照實驗要求將細胞種植到新的培養(yǎng)瓶/皿中。 

注意事項 

1. 對細胞有損傷，應(yīng)盡量縮短孵育時間；

 2. 如果細胞培養(yǎng)在不含血清的培養(yǎng)基中，消化完畢，加入PBS，500×g離心10分鐘， 移除PBS，將細胞重懸于所用的培養(yǎng)基中。