碧云天ATP檢測試劑盒

本產品線性范圍寬，96孔板中，在12個至10萬個細胞范圍內有良好的線性關系。不同細胞的檢測數量上限會有顯著不同。如果檢測的細胞數量不超過3萬，也可使用性價比更高但線性范圍略窄的CellTiter-Lumi™發光法細胞活力檢測試劑盒(C0065)。
本產品的性能達到甚至在有些方面優于國外同類產品。本產品的性能和用途與Promega公司的CellTiter-Glo ^® Luminescent Cell Viability Assay(簡稱CellTiter-Glo^®或CTG)和CellTiter-Glo ^® 2.0 Assay(簡稱CellTiter-Glo ^®2.0或CTG2.0)基本相同，本產品的檢測效果及與國外同類產品Competitor P及Competitor P2.0的檢測效果比較參見圖1，在發光強度和對于某些細胞的線性范圍有顯著的優勢。
本產品發光強度高。對于相同的細胞樣品，本產品的發光效果比國外同類產品Competitor P或Competitor P2.0強約40-99%，實測效果的差異會因細胞種類的不同有所不同，例如對于NIH3T3和HeLa細胞的檢測，CTL Plus的發光效果比國外同類產品Competitor P或Competitor P2.0強約60-99%；而對于Jurkat細胞的檢測，CTL Plus的發光效果則比國外同類產品Competitor P或Competitor P2.0強約40-50% (圖1D)。
本產品檢測靈敏度高，線性范圍寬，可以在12個至10萬個細胞范圍內呈現良好的線性關系。使用本產品檢測細胞數量僅為25個/孔時，發光強度可達空白孔的2倍左右。對于某些細胞，例如HeLa細胞等，CTL Plus有非常的線性范圍，標準曲線的斜率在12-400個細胞和在12-100,000個細胞范圍內基本相同(圖1A、1B，斜率分別為43.434和43.890)，但國外同類產品Competitor P標準曲線的斜率在12-400個細胞和在12-100,000個細胞范圍內發生了非常顯著變化(圖1A、1B，斜率分別為29.493和20.765)。本產品與國外同類產品Competitor P、Competitor P2.0的檢測效果比較參見圖1。

圖1. 本產品CellTiter-Lumi™ Plus Luminescent Cell Viability Assay Kit (CTL Plus)和國外同類競爭產品Competitor P、Competitor P2.0對不同細胞的檢測效果。圖A-C為CTL Plus和Competitor P對不同數量HeLa細胞在白色96孔板中的檢測效果，圖D為CTL Plus、Competitor P和Competitor P2.0對10萬個/孔NIH3T3、HeLa和Jurkat細胞在白色96孔板中的檢測效果。實際讀數會因細胞種類、檢測儀器等的不同而存在差異，圖中數據僅供參考。

本產品操作簡單，讀數穩定，檢測速度快，完成檢測僅需約10分鐘。本產品比常見的MTT、alamarBlue、Calcein-AM、WST-1、CCK-8等其它細胞活力測定方法更加簡單快捷。只需把試劑盒提供的單一即用型試劑CellTiter-Lumi™ Plus發光法檢測試劑與培養細胞等體積混合，反應10分鐘后即可進行化學發光檢測。無需洗滌細胞，也無需更換或去除培養液。并且化學發光非常穩定，在反應開始后的10分鐘內無顯著變化，30分鐘內的下降不超過10%。
本產品穩定性好。本試劑盒中的CellTiter-Lumi™ Plus發光法檢測試劑穩定性好，反復凍融5次對檢測效果基本無影響，反復凍融10次檢測效果下降不超過10%。本產品4℃保存3天對檢測效果無顯著影響，4℃保存7天檢測效果下降不超過10%。室溫保存1天，仍可保留80%以上的檢測效果。37℃保存1天，可保持60%以上的檢測效果。本產品即使僅保留約50%的檢測效果，仍可以滿足各種常規檢測。
本產品使用靈活便捷。本產品不僅適合少量樣品的檢測，也非常適合大量樣品的高通量篩選(high-throughput screening)檢測。
ATP，作為最重要的能量分子，在細胞的各種生理、病理過程中起著重要作用。ATP是細胞新陳代謝的一個重要指標，也是具有代謝活性細胞的重要標志性分子，并和活細胞數目成良好的線性關系。因此，ATP含量能很好地反應活細胞的數目，即本試劑盒可以通過測定ATP含量來進行細胞計數或檢測細胞活力。
本試劑盒通過ATP檢測細胞活力的原理參見圖2。借助ATP依賴的螢光素酶催化的螢光素發光反應，ATP可以通過測定化學發光來進行定量。由于ATP含量能很好地反映活細胞的數目，而ATP含量和發光強度成正比，這樣就可以簡單地通過化學發光強度來計算出細胞活力或細胞數目。

圖2. 發光試劑盒檢測ATP的原理圖。

碧云天各種細胞增殖和細胞毒性檢測試劑盒的比較和選擇，請參考試劑盒使用說明書。
對于96孔板，推薦使用100μl細胞培養液和100μl的檢測試劑，總體積為200μl，此時本試劑盒每10ml可以進行100次檢測。對于384孔板，推薦使用25μl細胞培養液和25μl的檢測試劑，總體積為50μl，此時本試劑盒每10ml可以進行400次檢測。也可以用其它體積的試劑進行檢測，但細胞培養液和檢測試劑體積的比例須為1:1。雖然有數據顯示適當減少檢測試劑的用量也很可能會得到較好的結果，但對于細胞數量偏多、細胞數量特別少或者重復性要求比較高的情況，建議按照推薦用量進行檢測。
包裝清單：

保存條件：

-20℃避光保存，至少一年有效。
注意事項：
發光法細胞活力檢測試劑盒的檢測試劑中含有螢光素酶，反復凍融會導致其逐漸失活。盡管經測試本試劑反復凍融5次對于其檢測效果無顯著影響，為取得良好的使用效果，次解凍后可適當分裝保存，但需注意分裝的容器不能有ATP污染。反復凍融過程中，可能會導致檢測試劑中出現少量沉淀，此時宜平衡至室溫，并盡量溶解。如仍有殘留的不溶物，可以離心去除后使用，經測試不會影響后續的檢測效果。
待測藥物的溶劑含量較高時可能會干擾螢光素酶反應，從而影響化學發光信號。可以通過設置含有溶劑的細胞培養液對照孔排除溶劑的干擾。經測試，最終反應體系中DMSO含量在2%以內不會對反應產生影響。
檢測時需使用白色或黑色的96孔板或384孔板。如果使用普通透明的96孔板或384孔板，相鄰孔之間會產生相互干擾。
使用說明中提供了檢測ATP標準品的方法，實際檢測細胞活力時通常并不需要檢測ATP標準品。
本產品于專業人員的科學研究用，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內。
為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

常見問題：
1.Luminometer和熒光分光光度計有何不同？
熒光分光光度計檢測的樣品本身不能發光，樣品需要由特定波長的激發光激發，然后才能產生熒光并被熒光分光光度計檢測。Luminometer檢測的樣品本身可以發光，不需要激發光進行激發。也就是說luminometer是檢測化學發光(螢光)的儀器。有些型號的熒光分光光度計也具有luminometer的功能，即也可以檢測化學發光。您所使用的熒光分光光度計能否用于化學發光的測定請仔細閱讀該儀器的說明書。
2. 可以進行螢光素酶報告基因檢測的儀器是否就可以用于本試劑盒的檢測？
是。螢光素酶報告基因的檢測原理和本試劑盒的原理相同，可以用相同的儀器測定。