中文名稱：MTS細胞增殖與細胞毒性檢測試劑盒
英文名稱：MTS Cell Proliferation And Cytotoxicity Detection Kit
產品規格：500次
貨號：FS-01X98521
MTS是一種新型甲臜化合物，和MTT同屬四唑氮衍生物。MTS能被活細胞里的線粒體脫氫酶降解而產生棕黃色水溶性的甲臜，通過測定甲臜的光譜吸收，進而可以測定細胞的增殖情況。
產品介紹:
| 產品特點： 1．本試劑盒是單溶液式細胞增殖與細胞毒性檢測試劑，主要成分包含MTS和一個電子耦合試劑，溶液的穩定性強，反應的靈敏度高。 2．操作簡便、快捷。可直接加入到檢測平板。在96-孔板中檢測時，無需洗滌或收獲細胞，免去溶解步驟。 3．無放射性。不需要配制液閃混合物，也不需要處理廢棄物。 4．與MTT相比，使用更安全。不需要使用揮發性的有機溶劑來溶解甲臜產物。 5．操作靈活，與MTT不同，平板讀數后可放回溫箱繼續孵育，使顏色進一步生成。 儲存條件：低溫運輸，-20℃避光保存，有效期半年。 使用效果： 96孔板中加入細胞100μL/孔(約1×104)，37℃，5% CO2細胞培養箱培養24小時，加入適當濃度的受試化合物。培養箱中孵育適當時間，每孔中加入10μL的MTS細胞增殖及毒性檢測溶液。37℃孵育1-4小時。490nm波長檢測光密度。 |
培養操作步驟：
1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養板（每孔一片）或培養皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中，使蓋玻片*浸在培養液中；
5．將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時，將培養板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
實驗報告：
一、分離與培養： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養； 5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min； 2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜； 5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
大腸桿菌顯色培養基 E.Coli Chromogenic Medium 1000ml M58103 用于快速、準確檢測大腸桿菌大腸桿菌培養24小時，顯蘭色
9cm平皿 M58104
大腸菌群顯色培養基 Coliform Chromogenic Medium 1000ml M58105 用于快速、準確檢測大腸菌群大腸菌群培養24小時，顯蘭色
9cm平皿 M58106
大腸桿菌／大腸菌群顯色培養基 E.Coli/Coliform Chromogenic Medium 1000ml M58107 用于快速、準確同時檢測大腸桿菌和大腸菌群，培養24小時，大腸桿菌顯紫色,大腸菌群顯紅色
9cm平皿 M58108
TBX 培養基 TBX Agar 1000ml M58109 用于快速、準確檢測大腸桿菌大腸桿菌培養24小時，顯蘭色
9cm平皿 M58110
細菌總數顯色培養基 Total Genes Chromogenic Medium 250g M58111 用于快速、準確檢測細菌總數，培養24小時，細菌顯紅色
9cm平皿 M58112
O157顯色培養基 O157 Chromogenic Medium 1000ml M58113 用于O157菌的顯色培養
9cm平皿 M58114
沙門氏菌顯色培養基 Salmonella Chromogenic Medium 1000ml M58115 用于沙門氏菌的顯色培養
9cm平皿 M58116
李斯特氏菌顯色培養基 Listera Chromogenic Medium 1000ml M58117 用于李斯特氏菌的顯色培養
9cm平皿 M58118
金黃色葡萄球顯色培養基 Staphylococcus Chromogenic Medium 1000ml M58119 用于的顯色培養
9cm平皿 M58120
霉菌和酵母菌顯色培養基 Mould and Yeast Chromogenic Medium 1000ml M58121 用于霉菌和酵母菌的顯色培養
9cm平皿 M58122
弧菌顯色培養基 Vibrio Chromogenic Medium 1000ml M58123 用于弧菌的顯色培養，副溶血性弧菌顯藍色，其它弧菌顯無色。
坂崎桿菌顯色培養基 Enterobacter sakazakii Chromogenic Medium 1000ml M58124 用于坂崎桿菌的顯色培養，坂崎桿菌顯藍色，其它腸桿菌顯無色。
尿道定位顯色培養基 Urine Orientation Chromogenic Medium 1000ml M58125 用于分離和鑒別常見尿道致病菌
麥康凱瓊脂基礎(SMAC) Sorbitol Maconkey Agar Base 250 M58126 用于大腸桿菌0157的分離培養(SN標準)
A 1.25μg/支*5 M58127 添加于100ml HB0121中
1%亞碲酸鉀溶液 5ml*10 M58128 適量添加于HB0121
顆粒體蛋白(GRN)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Granulin (GRN) 96T Homo sapiens (Human)
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