RESOLVOSIL BSA-7 牛血清蛋白鍵和硅膠手性柱

RESOLVOSIL BSA-7 牛血清蛋白手性柱
RESOLVOSIL BSA-7 手性柱，是牛血清蛋白BSA（Bovine Serum Albumin）共價鍵合在Nucleosil 300A-7um硅球上。優點是選擇性非常高，如配合高靈敏度檢測器，需要極少的進樣量，細微的調整流動相比例，可以改變樣品的保留，而且重現性很好。原理：
RESOLVOSIL的分離原理是利用蛋白對小分子量的樣品的手性選擇得到的。BSA等一些蛋白能夠交聯大量具有手性氨基酸，并通過共價形式與HPLC使用的硅球鍵合，這樣得到了具有光學活性的HPLC填料。并成功的運用在氨基酸及衍生物的手性拆分上。色譜柱使用條件：1） 由于RESOLVOSIL蛋白質改性類手性色譜柱的結果，容易受色譜條件（PH,離子強度，有機改性劑和溫度）的影響。所以這些色譜條件的參數必須在每次檢測時得到嚴格控制。同時每次對流動相體系的改變，都要保證足夠的時間（幾個小時）來平衡系統，保證實驗結果的重現性。2） 流動相，RESOLVOSIL手性柱可以承受的水性緩沖液的PH值范圍是5-8.緩沖鹽可以使用磷酸鹽或硼酸鹽，濃度在0.01M-0.2M之間控制PH值，來改善樣品的分離度。另外可以添加少量的（<5%）的正丙醇改變流動相的溶解性和表面張力。通常，樣品的保留時間在正丙醇濃度1-2%之間變化很大，但正丙醇濃度>5%時對保留時間沒有影響。注意：RESOLVOSIL 手性柱是不能在常規的反相流動相（乙腈/甲醇）中使用。在由常規反相操作切換RESOLVOSIL 手性柱時一定要*清洗系統。3） 色譜條件對RESOLVOSIL蛋白質改性類手性色譜柱的結果有很大影響保留時間和分離度，受多種因素（PH,緩沖鹽濃度，表面張力等）影響流動相的選用上應考慮：容易得到，成本低，無毒和不影響生物活性。紫外，熒光和電化學檢測器都與RESOLVOSIL 手性柱是匹配的。水性樣品可以直接進樣。RESOLVOSIL手性柱的機械強度高，能夠承受壓力在300bar（4200psi）下的較高流速。4） 承載量：為保證的分離度，RESOLVOSIL 手性柱每次進樣濃度應低于0.2umol。更高的進樣濃度都會造成色譜柱過載而引起分辨率下降。為延長柱壽命，在分析生物樣品時，建議使用反相流動相，保護柱或者閥切換技術。5） 穩定性：由于RESOLVOSIL手性柱是在BSA上鍵合小分子官能團并共價鍵合在硅球上。色譜柱性能的穩定性決定于BSA蛋白結構的穩定，為避免蛋白的變性，應嚴格遵守以上色譜使用條件。長時間保存時，應使用含疊氮化合物的水溶液平衡色譜柱，并將色譜柱放在冰箱中低溫保存。RESOLVOSIL BSA-7

Silica-based protein phase
for HPLC enantiomer separation

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