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    輔酶ⅠNAD測試盒50管/24樣

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    • 型號
    • 品牌其他品牌
    • 所在地上海市
    • 更新時間2022-04-13
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    • 入駐年限8
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    公司秉承“專注品質、信守承諾、積極溝通、創新服務”的企業文化積極參與生物領域的技術創新和技術服務,力求為我國科研事業更好的,更專業的服務!


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    貨號BJ-01S9511
    輔酶ⅠNAD測試盒50管/24樣公司*的商品:AMPK gamma 1腺苷酸活化蛋白激酶γ1抗體AANAT芳香胺N-乙酰化轉移酶抗體ADCY8腺苷酸環化酶8抗體ADCY10腺苷酸環化酶10抗體ADCY5腺苷酸環化酶5抗體
    輔酶ⅠNAD測試盒50管/24樣 產品詳情

    產品屬性:

    產品名稱檢測方法規格貨號
    輔酶ⅠNAD測試盒50管/24樣可見分光光度法50管/24樣BJ-01S9511

    商品介紹:

    測定意義

    輔酶ⅠNAD(H)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞中,NAD+是糖酵解(EMP)和三羧酸循環(TCA)的主要氫受體,生成的NADH經呼吸電子鏈(ETC)傳遞把電子交給氧,在合成ATP的同時,形成大量的ROS,同時NADH再生為NAD+。糖、脂、蛋白質三大代謝物質分解中的氧化反應絕大部分通過這一體系完成。NAD(H)含量和NADH/NAD+比值的高低可用于評價糖酵解和TCA循環的強弱。較高的NAD(H)及NADH/NAD+比值說明細胞呼吸耗氧量較高,處于過氧化狀態。此外,NADH/NAD+比值升高也可抑制糖酵解和TCA循環。另外,NAD+降解產物對細胞信號傳導、代謝和基因表達等具有重要的調控作用。

    測定原理

    分別用酸性和堿性提取液提取樣品中NAD+和NADH,NADH通過PMS的遞氫作用,還原氧化型噻唑藍(MTT)為甲瓚,在570nm下檢測吸光值;而NAD+可被乙醇脫氫酶還原為NADH,進一步采用MTT還原法檢測。

    需自備的儀器和用品

    可見分光光度計、臺式離心機、移液器、1 mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

    QQ截圖20220307153443.png

    注意事項:

    ①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。

    ②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。

    ③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

    ④底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。

    ⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。

    ⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。

    ⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。

    ⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。

    ⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用

    樣品制備:

    1). 直接或稀釋使用清亮無色中性液體樣品,體積可達2.000ml。

    2). 過濾混濁溶液。

    3). 除去樣品中的CO 2 (果糖含量測試盒說明書過過濾)。

    4 ). 果糖含量測試盒說明書過加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調至8.0。

    5 ). 調整酸性淺色樣品的PH值至8.0,孵育約15分鐘。

    6 ). 用空白樣品做對照測定有色樣品(如有必要調整PH值至8.0)。

    7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺處理深色未經稀釋或體積更大的樣品。

    8 ). 壓碎、攪勻固體或半固體樣品,用水溶解提取。

    9 ). 用Carrez試劑將含有蛋白質的樣品去蛋白。

    10).含脂肪的樣品用熱水提取。


    乙醇脫氫酶(ADH)測試盒    微量法    乙醇脫氫酶測試盒100管/96樣

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    操作流程:

    1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

    2. 設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;

    3. 樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。

    4. 除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

    5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。

    6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

    7. 每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。



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