客戶只需提供樣品和待檢測基因名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實驗報告給您。
產(chǎn)品名稱：Cy3
規(guī)格：5 mg/25 mg/50 mg
貨號：BJP1116
分類：熒光定量PCR試劑盒
產(chǎn)品僅用于科研儲存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運輸：低溫、避光，快遞免費送貨上門。
染料法
探針法
可進行相對，定量表達分析，定性分析，SNP檢測等
實驗報告
·電泳圖 ·標(biāo)準(zhǔn)曲線
·溶解曲線 ·擴增曲線
·完整的實驗過程、試劑、儀器及分析報告
儲存條件：
14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
探針法：
aqMan 探針是一種寡核苷酸探針，它的熒光與目的序列的擴增相關(guān)。它與目標(biāo)序列上游引物和下游引物之間的序列配對。熒光基團連接在探針的5’ 末端，而淬滅劑則在3’ 末端。當(dāng)完整的探針與目標(biāo)序列配對時，熒光基團發(fā)射的熒光因與3’ 端的淬滅劑接近而被淬滅。但在進行延伸反應(yīng)時，聚合酶的5’ 外切酶活性將探針進行酶切，使得熒光基團與淬滅劑分離。隨著擴增循環(huán)數(shù)的增加，釋放出來的熒光基團不斷積累。因此熒光強度與擴增產(chǎn)物的數(shù)量呈正比關(guān)系。相對于染料法,Taqman探針法具有更高的特異性和準(zhǔn)確性。
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檢測步驟：
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照)，每個測試反應(yīng)體系配制如下表：
試劑 每個反應(yīng)加入的量 N個反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
（1） 計算好各試劑的使用量，加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中，充分混勻，10000rpm離心10s，向設(shè)定的N個PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液，向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團：設(shè)置為FAM。淬滅基團：NONE，請勿選擇ROX參比熒光。
人內(nèi)臟脂肪細胞現(xiàn)貨供應(yīng)Talin-1 (C45F1) Rabbit mAb20 ul
人牙周膜成纖維細胞現(xiàn)貨供應(yīng)Talin-1 (C45F1) Rabbit mAb100 ul
人肺癌組織源細胞說明書MMP-2 Antibody100 ul
大鼠顱骨成骨細胞現(xiàn)貨供應(yīng)Fyn Antibody20 ul
大鼠腦成纖維細胞說明書Fyn Antibody100 ul
小鼠肺成纖維細胞說明書Desmin Antibody100 ul
小鼠頜下腺上皮細胞說明書Phospho-NF-κB p65 (Ser536) (93H1) Rabbit mAb (Biotinylated)100 ul
C2C12（小鼠成肌細胞）價格α-Parvin Antibody100 ul
U-87 MG（人腦星形膠質(zhì)母細胞瘤細胞）價格Phospho-AMPA Receptor 2 (GluA2) (Tyr876) Antibody500 ul
SF17（人腦瘤細胞）說明書Mouse (MOPC-21) mAb IgG1 Isotype Control (violetFluor™ 450 Conjugate)100 ul
SNU-5（人胃癌細胞）說明書Phospho-SATB1 (Ser47) Antibody100µl
SW-13（人腎上腺皮質(zhì)癌細胞）現(xiàn)貨供應(yīng)E2F4 (E3G2G) Rabbit mAb100 ul
TE-10（人食管癌細胞）說明書Phospho-SMC1 (Ser360) Antibody100 ul
WERI-Rb-1（人視網(wǎng)膜神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞）價格Phospho-p53 (Ser15) (16G8) Mouse mAb (Biotinylated)100 ul
3T6-Swiss albino（小鼠胚胎成纖維細胞）報價CaMKIV Antibody100 ul
人腸動脈內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基現(xiàn)貨供應(yīng)Phospho-Met (Tyr1234/1235) (D26) XP® Rabbit mAb (Biotinylated)100 ul
人胎盤羊膜細胞*培養(yǎng)基現(xiàn)貨供應(yīng)CREB (48H2) Rabbit mAb (Biotinylated)100 ul
Cy3Amycolatopsisdecaplanina種屬: Amycolatopsisdecaplanina分離基物: 土壤安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 158生長條件: 28℃
Marinobacter│sp.分離基物: 水樣/表層海水凍干物模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 潛在的有機污染物降解菌/分離自石油富集菌群培養(yǎng)基: 821生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法
Coniothyrium│minitans斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 主要用于研究盾殼霉孢子形成的分子機理培養(yǎng)基: 14生長條件: 20℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
運動發(fā)酵單胞菌種屬: Zymomonas│mobilis凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 生產(chǎn)酒精。培養(yǎng)基: CM0199生長條件: 30℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
Bacillus│thuringiensis凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 產(chǎn)蛋白酶培養(yǎng)基: CM0002生長條件: 37℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
Bacillus│thuringiensis分離基物: 玉米螟凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 2生長條件: 28℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
Arthrobotrys│yunnanensis分離基物: 土壤斜面培養(yǎng)物；凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 18生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法；礦物油法
Bacillus│thuringiensis凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 主要用于分類學(xué)研究培養(yǎng)基: 2生長條件: 30℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
Saccharomyces│cerevisiae凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 釀造酒精、制面包。培養(yǎng)基: CM0077生長條件: 28-30℃存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法
操作程序：
由您提供該實驗中目的基因的相關(guān)資料（如：基因名稱、序列等信息），我們共同探討服務(wù)的可能性和技術(shù)路線；
商定服務(wù)收費、付款方式、服務(wù)期限等，并簽定技術(shù)服務(wù)合同。
有您提供實驗所需的足夠量的實驗樣本（100mg組織或107個細胞），本公司不接受您提供的RNA樣本
PCR所需引物/探針（如果用探針法），可以由您自己提供，也可以委托本公司設(shè)計合成（費用另計）。如果由您自己提供，必須是PAGE純化的高質(zhì)量的干粉，本公司不接受已溶解的引物/探針。
我們進行RNA抽提、RNA定量、反轉(zhuǎn)錄、Real-time PCR擴增、數(shù)據(jù)分析。
產(chǎn)品僅用于科研提供實驗報告，包括實驗過程、所用儀器試劑、擴增曲線、標(biāo)準(zhǔn)曲線和相關(guān)分析數(shù)據(jù)等。
