諾卡菌通用PCR檢測試劑盒品牌

組成及試劑配制:
1、諾卡菌通用PCR檢測試劑盒品牌酶標板：一塊（96孔）
2、 標準品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測稀釋液B：1×10ml。

樣本采集、存放及運輸：
1、樣本采集：各類型樣本按照常規(guī)方法采集；
2、存放：樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h，-70℃以下可長期保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融（多凍融3次）；
3、運輸：采用泡沫箱加冰密封進行運輸。
【標本要求】
人體鼻腔或咽部分泌物:用無菌捻拭子拭取鼻腔或咽部分泌物，將分泌物或咽拭子置入無菌玻璃管（含0.4ml滅菌生理鹽水），用無菌棉球?qū)⒃嚬苋o后，密閉送檢。標本可立即用于檢測，也可保存于-20℃待測。
【檢驗方法】
1.標本、對照品的核酸裂解處理
用商品化（取得醫(yī)療器械許可證）的RNA提取試劑盒處理標本，具體操作參見該試劑盒說明書。
或用Trizol法提取，方法如下：取100?l樣品置于1.5ml 離心管中，加入300?l裂解液（Trizol），再加入100， 混勻器上振蕩混勻5sec或顛倒混勻15次； 13000rpm離心15min， 吸取上層液體，加入等體積異丙醇，顛倒混勻室溫靜置10min， 13000rpm離心10min，輕輕倒去上清；加入700?l 75%乙醇，顛倒洗滌，13000rpm離心5min，輕輕倒去上清，倒置于吸水紙上，棄盡液體或4000rpm離心5sec，將管壁上的殘余液體甩到管底部，用微量加樣器盡量吸干液體，加入20?l DEPC-H2O溶解RNA。
2.試劑配制
取n×19?l H7N9核酸熒光PCR檢測混合液與n×1?l RT-PCR酶（n為反應(yīng)管數(shù)）,振蕩混勻數(shù)秒, 3000rpm離心數(shù)秒。
3.加樣取上述混合液20?l置于PCR管中，然后將樣品核酸提取液、DEPC-H2O、陽性對照品各5?l分別加入PCR管中，蓋好管蓋，立即進行PCR擴增反應(yīng)。
4. PCR擴增反應(yīng)管置于定量熒光PCR儀上，推薦循環(huán)參數(shù)設(shè)置：
45℃×10min; 95℃×15min;循環(huán)一次，再按95℃×15sec→60℃×60sec，循環(huán)45次;單點熒光檢測在60℃，反應(yīng)體系為25?l。
熒光通道檢測選擇：選用FAM通道。

ADD1 ELISA KitFBXO27蛋白抗體內(nèi)收蛋白1(ADD1)ELISA試劑盒
ENDOV ELISA KitFBXO4蛋白抗體內(nèi)切核酸酶V(ENDOV)ELISA試劑盒
ENDOG ELISA Kit成纖維細胞生長因子受體3抗體內(nèi)切核酸酶G(ENDOG)ELISA試劑盒
LIPG ELISA KitFAM71D蛋白抗體內(nèi)皮脂肪酶(LIPG)ELISA試劑盒
NOS3 ELISA KitF-box蛋白相關(guān)蛋白33抗體內(nèi)皮型一氧化氮合酶(NOS3)ELISA試劑盒
ESAM ELISA KitFBXL16蛋白抗體內(nèi)皮細胞粘附分子(ESAM)ELISA試劑盒
ESM1 ELISA KitFBXL20蛋白抗體內(nèi)皮細胞特異分子1(ESM1)ELISA試劑盒
Tie2 ELISA KitFBXL15蛋白抗體內(nèi)皮細胞TEK酪氨酸激酶(Tie2)ELISA試劑盒
ECE1 ELISA KitFBXL21蛋白抗體內(nèi)皮素轉(zhuǎn)化酶1(ECE1)ELISA試劑盒
ETRB ELISA KitF-box蛋白家族FBXO7抗體內(nèi)皮素受體B(ETRB)ELISA試劑盒
ETRA ELISA KitF-box蛋白家族FBXO11抗體內(nèi)皮素受體A(ETRA)ELISA試劑盒
EDN3 ELISA KitF-box蛋白家族FBXO25抗體內(nèi)皮素3(EDN3)ELISA試劑盒
EDN1 ELISA KitF-box蛋白家族FBXO18抗體內(nèi)皮素1(EDN1)ELISA試劑盒
ITLN2 ELISA KitFRG2B蛋白抗體內(nèi)凝集蛋白2(ITLN2)ELISA試劑盒
ITLN1 ELISA KitFAM71A蛋白抗體內(nèi)凝集蛋白1(ITLN1)ELISA試劑盒
EM2 ELISA KitFAM83F蛋白抗體內(nèi)嗎啡肽2(EM2)ELISA試劑盒
ENSα ELISA KitFBXL17蛋白抗體內(nèi)磺肽α(ENSα)ELISA試劑盒
EG-VEGF ELISA KitFCHSD1蛋白抗體內(nèi)分泌腺來源血管內(nèi)皮生長因子(EG-VEGF)ELISA試劑盒
ENGASE ELISA KitFBXL5蛋白抗體內(nèi)β-N-乙酰基氨基葡萄糖苷酶(ENGASE)ELISA試劑盒
BFP ELISA KitFBXL12蛋白抗體腦指蛋白(BFP)ELISA試劑盒
FABP7 ELISA KitFBXL3蛋白抗體腦型脂肪酸結(jié)合蛋白(FABP7)ELISA試劑盒
CKB ELISA KitF-box蛋白相關(guān)蛋白11抗體腦型肌酸激酶(CKB)ELISA試劑盒
MN1 ELISA KitFGFR1癌基因伴侶蛋白2抗體腦膜瘤基因1(MN1)ELISA試劑盒
BASP1 ELISA Kit成纖維細胞生長因子受體底物2抗體腦富含膜附著信號蛋白1(BASP1)ELISA試劑盒
NEP2 ELISA KitFNBP1L蛋白抗體腦啡肽酶2(NEP2)ELISA試劑盒
NEP ELISA KitGATA結(jié)合蛋白2伴侶蛋白抗體腦啡肽酶(NEP)ELISA試劑盒
CDNF ELISA KitCD349抗體腦多巴胺神經(jīng)營養(yǎng)因子(CDNF)ELISA試劑盒
BRP44L ELISA KitFISH蛋白抗體腦蛋白44樣蛋白(BRP44L)ELISA試劑盒
BRP44 ELISA Kit脂肪酸脫氫酶2抗體腦蛋白44(BRP44)ELISA試劑盒
CFTR ELISA Kit法尼基二磷酸法尼基轉(zhuǎn)移酶1/鯊烯合成酶抗體囊性纖維化跨膜傳導(dǎo)調(diào)節(jié)因子(CFTR)ELISA試劑盒
VAChT ELISA Kit叉頭蛋白D3抗體囊泡乙酰膽堿轉(zhuǎn)運蛋白(VAChT)ELISA試劑盒
VMAT2 ELISA Kit叉頭蛋白B1抗體囊泡單胺轉(zhuǎn)運蛋白2(VMAT2)ELISA試劑盒
OXR1 ELISA Kit纖維蛋白原β鏈抗體耐氧化性能蛋白1(OXR1)ELISA試劑盒
TOR3A ELISA Kit構(gòu)成激活過氧化酶活化增生受體γ樣蛋白2抗體耐扭蛋白3A(TOR3A)ELISA試劑盒
TOR2A ELISA Kit成蛋白相關(guān)蛋白1抗體耐扭蛋白2A(TOR2A)ELISA試劑盒
TOR1B ELISA Kit腫瘤病毒受體同源蛋白抗體耐扭蛋白1B(TOR1B)ELISA試劑盒
TOR1A ELISA Kit成纖維細胞生長因子11抗體耐扭蛋白1A(TOR1A)ELISA試劑盒
NCCT ELISA KitHSD13蛋白抗體鈉氯協(xié)同轉(zhuǎn)運蛋白(NCCT)ELISA試劑盒
NKCC2 ELISA KitWnt信號受體FZD2蛋白抗體鈉鉀氯協(xié)同轉(zhuǎn)運蛋白2(NKCC2)ELISA試劑盒
NKCC1 ELISA Kit口蹄疫病毒鈉鉀氯協(xié)同轉(zhuǎn)運蛋白1(NKCC1)ELISA試劑盒
NIS ELISA KitF-box蛋白9抗體鈉碘運輸?shù)鞍?NIS)ELISA試劑盒
NHE1 ELISA Kit脂肪酰基輔酶A還原酶1抗體鈉/氫交換因子1(NHE1)ELISA試劑盒
SGLT5 ELISA Kit細胞生長抑制基因39蛋白抗體鈉/葡萄糖協(xié)同轉(zhuǎn)運蛋白5(SGLT5)ELISA試劑盒
SGLT4 ELISA Kit磷酸神經(jīng)膜抗體鈉/葡萄糖協(xié)同轉(zhuǎn)運蛋白4(SGLT4)ELISA試劑盒
SGLT3 ELISA Kit脆性X相關(guān)蛋白1抗體鈉/葡萄糖協(xié)同轉(zhuǎn)運蛋白3(SGLT3)ELISA試劑盒
SGLT2 ELISA KitF-box蛋白家族FBXO31抗體鈉/葡萄糖協(xié)同轉(zhuǎn)運蛋白2(SGLT2)ELISA試劑盒

反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是末及倒數(shù)第二個堿基，應(yīng)嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。