參數規格:
產品名稱:人博卡病毒PCR試劑盒
產品貨號:YS-P013683
產品規格:50次
產品分類:PCR檢測試劑盒
產品運輸:低溫運輸
產品保存:-20℃保存
產品有效期:一年
產品特點:本產品就是根據保守區設計引物而開發的高靈敏熒光定量 PCR 產品。
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.公司產品僅用于科研對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
特點優勢:
1. 特異性:所有產品使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析,經過TIANDZ及自建龐大數據庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段,可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現性:該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證,重現性為100%。
3. 靈敏性:該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優勢1:序列資源豐富,除TIANDZ公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6. 優勢2:該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。
猴狀腺過氧化物酶(TPO)絡塞維(標準品)同源盒蛋白MEIS3抗體
猴特異性β1糖蛋白(PSG1/SP1)落新婦苷(標準品)顆粒分化蛋白抗體
猴甘露糖結合蛋白(MBP/MBL) 馬錢苷(標準品)單氨氧化酶A+B抗體
猴抗II型膠原抗體(Anti-CIIAb)馬錢苷酸(標準品)膜蛋白相互作用蛋白RGS16抗體
猴多配體聚糖1(SDC1)(標準品)膜型絲氨酸蛋白酶2抗體
猴抑瘤素M(OSM)麥冬皂苷D(標準品)多藥耐藥相關蛋白8/9/14抗體
猴核有絲分裂器蛋白1(NUMA1)麥角甾;麥角固(標準品)Mob1同源蛋白MOBKL2B抗體
猴性激素結合球蛋白(SHBG)麥角甾(90%)Mob1同源蛋白MOBKL2C抗體
猴神經肽Y受體Y1(NPYR1)蔓荊子黃素(標準品)復合型表皮生長因子樣結構域蛋白5抗體
猴表面膜免疫球蛋白D(mIgD) 芒果苷(標準品)低密度脂蛋白受體的誘導降解蛋白抗體
猴骨堿性磷酸酶(BALP) 芒果苷鋅指蛋白144抗體
猴谷氨酸脫羧酶1(GAD1)毛蕊異黃酮(標準品)生肌決定因子Myf5抗體
猴核孔蛋白188kda(NUP188)毛蕊異黃酮苷(標準品)磷酸化生肌決定因子Myf5抗體
猴重肽鐵蛋白(FTH)沒食子兒茶素(標準品)黑素皮質素2受體輔助蛋白2抗體
猴甘肽/甘素受體1(GALR1) 沒食子兒茶素沒食子酸酯(標準品)金屬硫蛋白3抗體
猴原鈣黏素β2(PCDHβ2) 沒食子酸絲裂原活化蛋白激酶MAP4K6抗體
人博卡病毒PCR試劑盒TNFRSF13B/TNFRSF14B/TACI/FITC 熒光素標記腫瘤壞死因子受體超家族成員13B抗體IgG3-羥酸 97%
CD272/BTLA/FITC 熒光素標記B和T淋巴衰減蛋白抗體IgG4-羥酸 97%
Cdc2 p34/FITC 熒光素標記周期素依賴性蛋白激酶p34抗體IgG4-異喹啉酸鹽酸鹽 98%
Phospho-cdc2 (Thr14)/FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化周期素依賴激酶1抗體IgG4-異酸 98%
Phospho-cdc2 (Tyr15) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化周期素依賴激酶1抗體IgG3-異氧酸 97%
Cdc6/FITC 熒光素標記分裂周期蛋白6抗體IgG4-異喹啉酸 97%
Phospho-cdc25C (Ser216) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化分裂周期蛋白25抗體IgG2-異氧-4,4,5,5-四-1,3,2-二氧雜烷 98%
cdc25A /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠分裂周期蛋白25抗體IgG異酸 97%
使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預培養按照樣品的采集與預培養按照菌檢驗要求進行。
2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取發病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原,本產品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(最好用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。