操作步驟：
1.編號：將樣品對應微孔按序編號，每板應設陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）
2.加樣：分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50μl。然后在待測樣品孔先 加樣品稀釋液 40μl，然后再加待測樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，
3.溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液：將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用。
5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒后棄去，如此 重復 5 次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶標試劑 50μl，空白孔除外。
7.溫育：操作同 3。
8.洗滌：操作同 5。
9.顯色：每孔先加入顯色劑 A50μl，再加入顯色劑 B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10 分鐘.
10.終止：每孔加終止液 50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。
11.測定：以空白空調零，450nm 波長依序測量各孔的吸光度（OD 值）。 測定應在加終止 液后 15 分鐘以內進行。
服務：
我們可以根據您的應用需要，比如在檢測范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求，而量身定制檢測試劑盒，有效控制檢測試劑成本。并可提供免費代測。
產品名稱 | 人吖啶橙(AO)ELISA檢測試劑盒 |
英文名稱 | People with acridine orange (AO) ELISA Kit |
貨號 | YS-P10993 |
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試劑配制
1、酶聯板（Assay plate ）：一塊（96孔或者48孔）。
2、標準品（Standard）：2瓶（凍干品）。
3、樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。
4、生物素標記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6、生物素標記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7、辣根過氧化物酶標記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8、底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。
樣本實驗前準備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
（2）血漿：
應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
（3）尿液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
（4）細胞培養上清：
檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。
（5）培養細胞
檢測細胞內的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
（6）組織標本
切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
左旋山莨菪堿 訂購|咨詢 規格： 20mg
酚-7-葡萄糖苷 16290-07-6 訂購|咨詢 規格： 10mg
3,4,5-三 1916-07-0 訂購|咨詢 規格： 20mg
人參皂苷RC 11021-14-0 訂購|咨詢 規格： 20mg
蘋果酸 6915-15-7 訂購|咨詢 規格： 20mg
莫諾苷 25406-64-8 訂購|咨詢 規格： 20mg
6627-72-1 訂購|咨詢 規格： 20mg
柯里拉京 23094-69-1 訂購|咨詢 規格： 20mg
環氧續隨子醇 28649-60-7 訂購|咨詢 規格： 20mg
黃芪甲苷 84687-43-4 訂購|咨詢 規格： 20mg
異甘草苷 5041-81-6 訂購|咨詢 規格： 20mg
3,29-二苯甲酰基栝樓仁三醇 873001-54-8 訂購|咨詢 規格： 10mg
(-)-丁香樹脂酚-4-O-β-D- 1369 訂購|咨詢 規格： 20mg
紫草酸 28831-65-4 訂購|咨詢 規格： 20mg
重樓皂苷Ⅶ 76296-75-8 訂購|咨詢 規格： 20mg
人吖啶橙(AO)ELISA檢測試劑盒1張 尼龍膜，13×20 cm Nylon Membrane (Pharmacia) 常溫保存
1張 PVDF膜，0.45 μm，13×20 cm PVDF Membrane (Millipore) 常溫保存
250mL 氨基黑染膜液 Amido Black 10B BlotStain 避光保存
20L 濕法電轉液（干粉） Wet Transfer Buffer Powder 4℃保存
20L 半干法電轉液（干粉） Half-Wet Transfer Buffer Powder 4℃保存
100mL Western印跡膜封膜液（尼龍膜） Western Blot Blocking Buffer 4℃保存
100mL Western印跡膜封膜液 (NC膜和PVDF膜) Western Blot Blocking Buffer 4℃保存
100mL 印跡膜抗體稀釋液 Antibody Dilution Buffer 4℃保存
50mL Western印跡膜抗體清除劑 Western Blot Antibody Erasol 室溫保存
200mL Western印跡膜抗體清除劑 Western Blot Antibody Erasol 室溫保存
250mL Western印跡膜洗膜液
100mg 5-溴-4-氯-3-吲哚磷酸 BCIP -20℃保存
250mg 四氮唑藍 NBT 4℃避光保存
