ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應(yīng)外,有時常見到一些錯誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:
①標本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴格按照使用說明操作,必能得出準確的實驗結(jié)果,可提供免費技術(shù)咨詢服務(wù)!
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
性別決定區(qū)Y框蛋白2ELISA試劑盒 | SOX-2 | FS-P65954 |
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
1進口抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿,細胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5公司產(chǎn)品僅用于科研可檢測指標齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等?
樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐3?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
G氨丁受體γ1/GABAA Rγ1抗體Anti-Melamine/FITC 熒光素標記抗三聚抗體IgG1,4,7,10-四氮雜環(huán)十二烷四鹽鹽(>98.0%(N))卷曲同源物8(FZD8)ELISA試劑盒
磷化γ氨丁γ2受體抗體Anti-Melamine/FITC 熒光素標記抗三聚抗體IgG己二雙(2-乙己)酯(>98.0%(GC))卷曲同源物7(FZD7)ELISA試劑盒
G氨丁受體γ3/GABAA Rγ3抗體Anti-Phospho-Met (Tyr1003) /FITC 熒光素標記磷化肝生長因子受體(原癌因)抗體IgG4-叔戊酚(>98.0%(GC))卷曲同源物6(FZD6)ELISA試劑盒
G氨丁受體ε/GABAA Rε抗體Anti-Phospho-Met (Tyr1234/1235) /FITC 熒光素標記磷化肝生長因子受體(原癌因)抗體IgG4-己酚(>98.0%(GC))卷曲同源物5(FZD5)ELISA試劑盒
γ-氨丁受體相關(guān)蛋白抗體Anti-Phospho-Met (Tyr1349) /FITC 熒光素標記磷化肝生長因子受體(原癌因)抗體IgG4-正庚酚(>98.0%(GC))卷曲同源物4(FZD4)ELISA試劑盒
G氨丁A型受體θ/GABAA Rθ抗體Anti-Melan-A/MART-1 /FITC 熒光素標記黑色素瘤相關(guān)抗原/黑色素-A抗體IgG4-戊酚(>97.0%(GC))卷曲同源物3(FZD3)ELISA試劑盒
G氨丁A型受體rho1 /GABAA Rρ1抗體Anti-Menin/Men1/FITC 熒光素標記Menin抑癌蛋白抗體IgG4-(1,1,3,3-四丁)酚(>93.0%(GC))卷曲同源物2(FZD2)ELISA試劑盒
G氨丁A型受體rho2 /GABAA Rρ2抗體Anti-Metal ion transporter/FITC 熒光素標記擬南介金屬離子轉(zhuǎn)運蛋白抗體IgG2,2-雙(4-羥)烷(>99.0%(GC))卷曲同源物10(FZD10)ELISA試劑盒
G氨丁B型受體結(jié)合蛋白抗體Anti-Metronidazole/FITC 熒光素標記抗硝唑抗體IgG2,2-雙(4-)-1,1-二氯乙烷(>98.0%(GC))卷曲同源物1(FZD1)ELISA試劑盒
谷氨受體δ1/GluR-δ1抗體Anti-Mfn1/FITC 熒光素標記線粒體融合蛋白1抗體IgG2,2-雙(4-)-1,1-二氯乙烯(>99.0%(GC))聚集蛋白聚糖(AGC)ELISA試劑盒
谷氨受體相關(guān)蛋白1抗體Anti-MGMT /FITC 熒光素標記O6鳥嘌呤DNA轉(zhuǎn)移酶抗體IgG2,4-二氯酚(>98.0%(GC))巨軸索神經(jīng)蛋白(GAN)ELISA試劑盒
環(huán)磷鳥苷門控通道蛋白CNG4抗體Anti-MGr1-Ag/37LRP /FITC 熒光素標記層粘連蛋白受體1抗體(N端)IgG2,4-二氯酚(>98.0%(GC))巨噬幼紅黏附蛋白(MAEA)ELISA試劑盒
甘氨受體α1+甘氨受體α2抗體Anti-MGr1-Ag/37LRP /FITC 熒光素標記層粘連蛋白受體1抗體(C端)IgG1,2-二溴-3-氯烷(1mg/mL的溶液)巨噬炎性蛋白5(MIP5)ELISA試劑盒
甘氨受體α3/GlyR α3抗體Anti-MICA/FITC 熒光素標記一種應(yīng)激分子抗體IgG鄰二丁芐酯(>97.0%(GC))巨噬炎性蛋白4α(MIP4α)ELISA試劑盒
G蛋白偶聯(lián)受體C5家族亞型D抗體Anti-MIP-1 Alpha/FITC 熒光素標記巨噬炎癥因子1α抗體IgG鄰二二戊酯(>98.0%(GC))巨噬炎性蛋白3β(MIP3β)ELISA試劑盒
性別決定區(qū)Y框蛋白2ELISA試劑盒Anti-ESR2 Antibody美澳型核果褐腐病菌注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
Anti-ESRRG Antibody細鏈格孢注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
Anti-ETF1 Antibody芽孢桿菌屬拉丁屬名: Bacillus sp.
Anti-ETF/TEAD2 Antibody吸水鏈霉菌吸水亞種拉丁屬名: Streptomyces hygroscopicus
Anti-ETS1 Antibody鏈格孢拉丁屬名: Alternaria alternata
Anti-ETV4 Antibody產(chǎn)紅青霉拉丁屬名: Penicillium rubens
Anti-EYA4 Antibody波茨坦短芽孢桿菌拉丁屬名: Brevibacillus borsensis
Anti-EXO1 Antibody球孢白僵菌用途: 昆蟲防治研究
Anti-ETV6 Antibody聚生殼菌注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
Anti-EWSR1 Antibody水棲黃桿菌拉丁屬名: Flavobacterium aquidurense
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準