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    ATPase染色液(鈣鈷法)

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    • 所在地上海市
    • 更新時間2022-05-16
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    上海撫生實業有限公司(Shanghai Fusheng Industrial Co., Ltd.,China)先后與天津中醫學院、復旦大學、上海交通大學醫學院、上海交通大學、華東師范大學、第二軍醫大學、南京大學,暨南大學,南京工業大學,曙光醫院、華山醫院、瑞金醫院、上海有機研究所、中科院上海分院等多家單位建立了良好的合作關系。本公司可為您提供科研ELISA試劑盒,種屬標本齊全,有專門針對人血清、血漿、全血、分泌物、尿液、細胞培養上清液、組織勻漿、組織液等標本的試劑盒;另有針對各種動物(鼠、兔、牛、馬、雞、豬、狗、山羊、猴、魚)的科研試劑。


    公司秉承“專注品質、信守承諾、積極溝通、創新服務”的企業文化積極參與生物領域的技術創新和技術服務,力求為我國科研事業更好的,更專業的服務!


    公司售后服務宗旨:有質量問題可申請退換,有技術疑問可隨時給于解答,一對一的客服服務,客戶的需求也是我們不斷的更新服務。






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    貨號FS-X10018
    ATPase染色液(鈣鈷法)正在熱銷的產品:SSA/52KDa Ro 核糖核蛋白抗原抗體辛 ,≥99.5% (GC)
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    ATPase染色液(鈣鈷法) 產品詳情

    中文名稱:ATPase染色液(鈣鈷法)

    英文名稱:

    產品規格:5×50ml

    貨號:FS-X10018

    產品介紹:

    用途:

    腺苷三磷酸酶染色

    注意事項:

    主要由孵育液、、硫化銨、陰性對照孵育液等組成。酶活性部位呈棕黑色或黑色。

    儲存條件:4℃,避光,6個月

    培養操作步驟:

    1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

    2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);

    3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;

    4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;

    5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

    實驗報告:

    一、分離與培養:

    1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;

    2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

    3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

    4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

    5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

    二、免疫熒光鑒定:

    1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

    2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

    3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

    4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

    5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

    6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

    操作規程

    1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.

    2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。

    3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。

    4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

    5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

    6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

    7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

    8、結果分析

    a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100

    b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

    抗生溶桿菌皮質1抗體Human GLP2(Glucagon Like Peptide 2) 人前列腺E1(PGE1)免疫試劑盒

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    黑平188磷化P27抗體/周期依賴激抑制劑抗體Human GABA(Gamma-aminobutyric acid) 人葡萄糖激(GCK)免疫試劑盒

    蛹蟲草Cordyceps│militaris 質量規格:>98%,分子生物學級Bκ 輕肽基因增強子核因子抑制因子ε試劑盒車葉草

    蝕脈鐮孢Fusarium│vasinfectum 質量規格:>99%,BRB群鏈球菌多糖抗體試劑盒草

    柔嫩艾美耳球蟲Eimeria│tenella 質量規格:>98%,BCB-淋巴趨化因子1試劑盒橙黃決明-6-葡萄糖
    ATPase染色液(鈣鈷法)金黃殼囊孢 L-蘇糖二單加氧3

    暗孢毛殼 四甲基羅丹明-5(6)-異硫酯狀瘤病16型IgM抗體

    白黑鏈霉 4-(5-甲基-1,2,4-噁二唑-3-基)磷肌

    灰樹花 N-叔丁氧羰基-N-甲基-L-酪二環己鹽可溶性低密度脂蛋白受體相關蛋白1

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