實驗過程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．對應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此，擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
產(chǎn)氣克雷伯氏菌PCR熒光定量檢測試劑盒 | Klebsiella aerogenesPCR | 多種規(guī)格 | BJ-P6909 |
實驗外包:
1.基因組學：基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學分析
2.轉(zhuǎn)錄組學：microRNA芯片、LncRNA芯片、表達譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學：2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測：DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測：Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測：HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細胞分選
7.代謝組學：GC-MS、LC-MS、NMR
8.細胞及動物模型：原代細胞、細胞模型、動物模型構(gòu)建
特點優(yōu)勢：
1. 特異性：所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析，經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證，重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性：該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現(xiàn)對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌，可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6. 優(yōu)勢2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。
二、操作步驟 1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。 2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。 3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。 | 三、注意事項 １．PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行。設(shè)立一個專用的PCR實驗室。 ２．純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言，只要能夠得到可靠的結(jié)果，純化的方法越簡單越好。 ３．所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。 ４．PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水，采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。 ５．試劑都應(yīng)該以大體積配制，試驗一下是否滿意，然后分裝成僅夠一次使用的量儲存，從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。 ６．試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。 ７．PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開，并且要充分混勻。
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操作流程
1. 整個檢測過程應(yīng)嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作，各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應(yīng)獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 所有試劑在使用應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū)，并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置；不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進行無害化處理后方可丟棄。
50T 大豆PCR檢測試劑盒 低溫運輸，-20℃保存醋酸鹽瓊脂進口、國產(chǎn)Acetate Agar 用于細菌醋酸鹽試驗250
0.1mg 山羊抗小鼠IgG，熒光素488標記 Goat Anti-Mouse IgG ,IF488 Conjugate 4℃保存 0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human B-lymphocyte antigen CD19
500U 熱敏 Antarctic Phosphatase -20℃保存 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Voltage-dependent P/Q-type calcium channel subunit alpha-1A
2 ug pPICZα A pPICZα A 低溫運輸，-20℃保存 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human D-amino-acid oxidase
2 ug pTrx-SUMO pTrx-SUMO 低溫運輸，-20℃保存 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Neuropilin-1
50T 乙型脊髓灰質(zhì)炎病毒PCR檢測試劑盒 低溫運輸，-20℃保存ER培養(yǎng)基進口、國產(chǎn)Eriksson Medium10升BR
1瓶 SK-HEP-1株 SK-HEP-1 低溫運輸和保存 1.56-100 ng/mL ELISA Kit for Human Semaphorin-4D
2 ug pECFP- ER pECFP- ER 低溫運輸，-20℃保存 31.2-2000 pg/mL 對蝦皮下和造血器官壞死病毒(HHNV)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)
亞碲酸鹽卵黃增菌液 5ml*10 0.078-5 ng/mL ELISA Kit for Human Carbonic anhydrase 3
改良月桂基硫酸鹽胨肉湯-萬,(mLST-Vm)顆粒 Modified Lauryl Sulfate Tryptose Broth- Vancomycin 300ml/袋*10
改良胨大豆肉湯培養(yǎng)基（mTSB） 250g 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Transmembrane protein 158
產(chǎn)氣克雷伯氏菌PCR熒光定量檢測試劑盒Napabucasin STAT3基因轉(zhuǎn)錄抑制劑(Napabucasin) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
BI-D1870 RSK抑制劑(BI-D1870) 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg
Pacritinib 野生型JAK2和突變型JAK2V617F抑制劑 2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
AGI-5198 R132H-IDH1抑制劑(AGI-5198) 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
Vps34-IN-1 Vps34抑制劑(Vps34-IN-1) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
KU-57788 DNA-PK抑制劑(KU-57788) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
checkpoint kinase inhibitor 細胞周期檢測點激酶抑制劑(AZD-7762) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
WEHI-539 hydrochloride Bcl-XL抑制劑 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg
Bexarotene 維甲酸X受體激動劑(RXR激動劑) 1mL(10mM)|50mg|100mg|500mg
A-1155463 BCL-XL抑制劑(A-1155463) 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
PP2 Src家族抑制劑(PP2) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
