一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽(yáng)性對(duì)照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽(yáng)性對(duì)照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號(hào)。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(最好用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽(yáng)性對(duì)照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號(hào)管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
5. 換槍頭,從 6 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
6. 換槍頭,從 5 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 4 號(hào)管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。
7. NC 管中不加任何陽(yáng)性對(duì)照。
8. 從 1-6 號(hào)管中分別取 5 μL 和待測(cè)樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見下步),每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽(yáng)性對(duì)照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
產(chǎn)品名稱:艾美耳球蟲屬通用熒光定量PCR試劑盒探針法
英文名稱:Eimeria spp.
貨號(hào):BJ-P9512
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
運(yùn)輸:低溫
注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
實(shí)驗(yàn)外包:
基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測(cè)、DNA甲基化檢測(cè)、使用方法:
特點(diǎn):
1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)鮑皰疹樣病毒保守序列設(shè)計(jì)的專一性引物,與相關(guān)病毒無(wú)交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量 PCR 檢測(cè),避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應(yīng)體系的熒光定量 PCR。
6. 本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
儲(chǔ)存條件:-20℃以下,有效期12個(gè)月。
改良Harris100ml|500ml
Mayer100ml|500ml
Carazzi100ml|500ml
Delafield100ml|500ml
Cole100ml|500ml
Scott藍(lán)化液500ml
過(guò)氧化物酶染色液(氧化WG-KI法)2×10ml|2×20ml
改良Lillie-Mayer100ml|500ml
Ehrlich100ml|500ml
伊紅染色液(水溶,1%)100ml|500ml
艾美耳球蟲屬通用熒光定量PCR試劑盒探針法大鼠 IL21R 基因全長(zhǎng)ORF克隆品紅亞硫酸鹽(FUCHSIN SULFITE)原位間接染色試劑盒
大鼠 IL17RB 基因全長(zhǎng)ORF克隆石蠟切片組織衰老特異性晚期脂褐素高碘酸希爾(PAS)法 50次
大鼠 IL20RB 基因全長(zhǎng)ORF克隆品紅亞硫酸鹽(FUCHSIN SULFITE)原位直接染色試劑盒
大鼠 IL13RA1 基因全長(zhǎng)ORF克隆P16蛋白表達(dá)西方雜交分析試劑盒 5次
大鼠 IL12RB2 基因全長(zhǎng)ORF克隆P21蛋白表達(dá)西方雜交分析試劑盒 5次
大鼠 IL10RB 基因全長(zhǎng)ORF克隆P16基因表達(dá)北方雜交分析試劑盒 5次
大鼠 IL10Ra 基因全長(zhǎng)ORF克隆P21基因表達(dá)北方雜交分析試劑盒 5次
大鼠 TNFRSF1A 基因全長(zhǎng)ORF克隆端粒活性TRAP電泳分析試劑盒 10次
大鼠 IFNAR1 基因全長(zhǎng)ORF克隆端粒活性TRAP實(shí)時(shí)定量檢測(cè)試劑盒 20次
大鼠 IL11RA 基因全長(zhǎng)ORF克隆人體hTERT表達(dá)實(shí)時(shí)定量檢測(cè)試劑盒 20次
大鼠 LTBR 基因全長(zhǎng)ORF克隆人體hTERT基因甲基化檢測(cè)試劑盒 20次