小鼠皮下結締組織細胞；L-WRN
英文名稱 | L-WRN：LWRN | 貨號 | AXB10129 |
生長特性 | 貼壁細胞 | 用途 | 僅供科研研究實驗 |
分類 | 小鼠細胞系 | 規格 | 1×10?cells/T25培養瓶 |
商品介紹：
年齡（性別） | 100 days |
生長特性 | 貼壁細胞 |
細胞形態 | 上皮細胞樣 |
詳情介紹 | L-WRN細胞通過R-spondin 3和noggin共表達載體轉染L-Wnt3A 獲得，并在含有G418和濕霉素b的培養基中選擇穩定克隆。 |
生物安全等級 | 2 |
生長培養基 | DMEM＋10% FBS(164210)+0.5 mg/mL G-418+0.5 mg/mL hygromycin B＋1% P/S |
推薦換液頻率 | 2~3次/周 |
凍存條件 | |
凍存液 | 55% 基礎培養基+40%FBS+5%DMSO |
溫度 | 液氮 |
培養條件 | |
氣相 | 空氣，95%；CO2，5% |
細胞株和細胞系的區別：
一、概念不同
1、細胞株：細胞株是通過選擇法或克隆形成法從原代培養物或細胞系中獲得具有特殊性質或標志物的培養物稱為細胞株（Cell Strain）。
2、細胞系：細胞系（cell line）指原代細胞培養物經傳代成功后所繁殖的細胞群體。 也指可長期連續傳代的培養細胞。
二、形成方法不同
1、細胞株：通過選擇法或克隆形成法從原代培養物或細胞系中獲得具有特殊性質或標志物的培養物成為細胞株。
2、細胞系：經過40-50次分裂的渡過第二次死亡危機，原代培養物經傳代成功成為細胞系。
三、細胞的延續性不同
1、細胞株：原代培養的細胞一般傳至10代左右就不容易傳下去了，細胞的生長就會出現停滯，大部分細胞衰老死亡。但是有極少數的細胞能夠度過“危機”而繼續傳下去，這些存活的細胞一般能夠傳到40--50代，這種傳代細胞叫做細胞株。
2、細胞系：細胞株的遺傳物質沒有發生改變。當細胞傳至50代以后又會出現“危機”，不能再傳下去。但是有部分細胞的遺傳物質發生了改變，并且帶有癌變的特點，有可能在培養條件下無限制地傳代下去，這種傳代細胞稱為細胞系。
細胞培養通風櫥的消毒及布局
保持細胞培養通風櫥內的整潔有序，將所有物品置于直視范圍內。
向放入通風櫥內的所有物品噴灑70%乙醇，擦拭清潔進行消毒。
在通風櫥中部開闊處放置細胞培養容器；移液器置于右前方易于取用；試劑和培養基置于右后方便于吸??；試管架置于中后部；小型容器置于左后部用于盛放廢液。
培養瓶/皿等物品的無菌操作
細胞培養污染物主要分為兩類：
化學污染物,如培養基、血清和水中的雜質、內毒素、增塑劑和去污劑。
生物污染物，如細菌、霉菌、酵母、病毒、支原體以及其他細胞系的交叉污染。
可通過充分了解污染源以及采用良好的無菌技術，降低污染發生的頻率和嚴重程度。
交叉污染的確認
為細胞換液時，要沿著培養瓶的一側輕輕地加入，而不是直接加到細胞中，以免損傷細胞，當培養的細胞株較為脆弱時尤其需要注意。
使用無菌玻璃吸管或一次性塑料吸管和移液器操作液體時，每支吸管只能使用一次，以免交叉污染。
細胞傳代的時間把握
當細胞呈指數增殖，貼壁培養的細胞已占據所有可用基質、沒有擴增空間，或懸浮培養的細胞已超過培養基質所支撐的能力，無法進一步生長時，細胞增殖速度將大大降低甚至停止。為了將細胞密度維持在最佳水平，以便細胞繼續生長，并且刺激進一步增殖，必須對細胞進行傳代。
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細胞培養的步驟：
細胞培養前的準備
細胞變質的征象包括核周出現顆粒、細胞與基質解離以及細胞質空泡形成。
這些變質征象可能為多種原因所致，例如：培養物污染、細胞系衰老或培養基中存在毒性物質，或者這些征象僅表明培養物需要更換培養基。
變質嚴重時將會成為不可逆的變化。
