Ham's F-10 培養液說明書

標準溶液的配制：

1.直接配制法    對于純凈的物質(稱做基準物質)可準確進行稱量，用蒸餾水溶解后，轉移到一定容積的容量瓶中稀釋至標線，溶液的準確濃度可以直接計算出來。溶質的純度、性質等對濃度有較大影響，為此，對用來直接配制標準溶液用的基準物質必須具備以下條件：

(1)物質的純度要高，含量不得低于99.9％，雜質的含量應當少到可以忽略的程度。

(2)物質的分子組成應與其化學式*符合，包括結水合物中的結品水含量也必須與其化學式相符合。如硼砂Na2B4O7·10H2O等。

(3)性質穩定，貯蔵時應不發生變化，不易吸收空氣中的水分、二氧化碳等氣體而改變其成分，不易風化潮解和被空氣氧化，烘干時不易分解等。此外最好使用分子量較大的基準物質以減小稱量誤差。

2.間接配制法    凡不符合基準物質條件的物質，可先配制成近似所需濃度的溶液，再用基準物質溶液或能與其發生定量反應的標準溶液進行滴定，求其準確濃度，這種通過滴定來確定準確濃度的操作叫做“標定”。間接法配制近似濃度溶液時不需用分析天平稱量和容量瓶配制，可用臺秤、量筒等器皿。將稱好的物質轉移到干凈的試劑瓶中，先加少量蒸餾水將其溶解，繼續用量筒加蒸餾水至需要量即可。由于大多數試劑不符合基準物的條件，故間接法配制標準溶液是經常的。如固體NaOH因易吸收空氣中的水分而潮解和吸收CO2使表面變質；濃鹽酸因易揮發而無法準確稱量；不易得到分析純級的試劑等，這些物質的標準溶液須用間接法來配制，經標定后再做標準溶液使用。

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產品名稱：Ham's F-10 培養液說明書

貨號：BJ-01R3322

規格：500ml

分類：培養基

儲存條件：4℃,4個月

用途：含有氯化鈉、、、葡萄糖等成分。

注意事項：無菌溶液。經過濾除菌處理。

注意事項：

1、盡注意無菌操作，避免污染。

2、避免反復凍融。

3、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

標準溶液的標定：

1.用基準物質標定法

(1)多次稱量法    用減重法精密稱取幾份(如2～3份)基準物質，分別倒入編號的干凈錐形瓶(或燒杯)內，各加少量蒸餾水溶解，再加指示劑后分別用待標定溶液滴定至等當點，各自記錄所消耗待標定溶液的體積，結合基準物質的重量分別算出溶液的準確濃度，最后取平均值做為標準溶液的濃度。

(2)移液管法    精密稱取一份基準物質，在干凈的小燒杯內加少量蒸餾水溶解，順玻棒全部轉移到已校正好的容量瓶中，多次沖洗燒杯洗液并入容量瓶中，最后配成一定體積的溶液，混勻。每次滴定用配套的移液管吸取并轉移至錐形瓶中，加指示劑后用待標定溶液滴定至等當點，每次做好記錄，根據所消耗待標定溶液的體積，結合基準物質的重量，分別算出溶液的準確濃度取平均值做為標準溶液的濃度。

2.比較法標定    如果待標定溶液能與某標準溶液進行反應，可吸量一定體積的某標準溶液，用待標定溶液滴定，或吸量一定體積的待標定溶液，用某標準溶液滴定。根據兩溶液所消耗的毫升數及某標準溶液的濃度，按N1V1＝N2V2式可以計算出待標定溶液的準確濃度。這種用標準落液來測定待標定溶液準確濃度的過程稱為“比較法”標定。如果某標準溶液的濃度由于某些原因不夠準確時，就會直接影響待標定溶液濃度的準確性，顯然比較法不如用基準物質直接標定的方法精確，但比較法簡便易行。

標定完畢，蓋緊標準溶液試劑瓶塞，瓶簽上注明標準溶液名稱、準確濃度和日期等。

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩轉株的工作濃度需要根據細胞類型，培養基，生長條件和細胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應性曲線，來確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動物細胞50-500μg/mL；細菌/植物細胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩定表達目的蛋白的細胞株，需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應曲線）來實現，至少選擇5個濃度。

1）  第一天：未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養板上，37℃，CO2培養過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細胞，可增加接種量。

2）  根據細胞類型，設定合適范圍內的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例，可設定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養基，換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養基。每個濃度做三個平行孔。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進行活細胞計數來確定阻止未轉染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數（通常是7-10天）內能夠殺死絕大多數細胞的濃度為穩定轉染細胞篩選用的工作濃度。

3.   穩定轉染細胞的篩選

1）     轉染48h后，用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養基來傳代細胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細胞處于活躍分裂狀態時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密，其效率會降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細胞稀釋至豐度不超過25%

2） 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養液。

3）  篩選7天后觀察并評估細胞克隆（集落）的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間，這取決于宿主細胞類型，轉染，以及篩選效果。

4） 挑取并轉移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養板，繼續用含藥物的篩選培養液維持培養7天。

5） 之后更換正常培養基培養即可。

Amycolata autotrophica自養無枝酸LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周Rabbit Anti-human IgM  兔抗人IgM 規格: 1mgPerlecan/Heparan Sulfate Proteoglycan 2  硫酸乙酰肝素蛋白多糖2 規格: 0.1ml

Rotavirus 輪狀病毒通用探針法熒光定量RT-PCR試劑盒（停） 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周PP2CA/PPM1A  蛋酸2C亞型α抗體 規格: 0.1mlCD24  CD24抗體 規格: 0.1ml

Radix polygoni multiflori何首烏染料法PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周DPCR1  DPCR1蛋白抗體 規格: 0.2mlGoat Anti-Guinea pig IgG/PE-Cy5.5  PE-Cy5.5標記的羊抗豚鼠IgG 規格: 0.1ml

Human Rhinovirus 16 人鼻病毒16 LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周NGB/neuroglobin  腦紅蛋白/神經紅蛋白/神經球蛋白抗體 規格: 0.1mlRAB6C  RAS基因相關蛋白Rab6C抗體 規格: 0.2ml

Rat Leukemia Virus(RaLV)大鼠白血病病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周ARTS1  脂肪細胞源性亮氨基肽抗體（管內皮細胞生因子誘導蛋白） 規格: 0.2mlCD276/B7H3  CD276抗體 規格: 0.2ml

馬鈴薯源性成分PCR試劑盒 種源性檢測 50次 低溫 負20度 一年 3-4周CAPZA2/CapZ alpha 2  F肌動蛋白α2亞基抗體 規格: 0.1ml

冬蟲夏草源性成分LAMP試劑盒 種源性檢測/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周Rabbit Anti-Bov IgG/PE-CY5  PE-CY5標記的兔抗牛IgG  規格: 0.1ml

Ovine pulmonary adenocarcinoma virus(OPAV)綿羊肺腺瘤病病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周SSA/52KDa Ro  核糖核蛋白抗原抗體 規格: 0.2ml

Pseudomonas syringae pv. mori丁香假單胞桿桑致病變種PCR試劑盒 植物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周WDR61  WD重復膜蛋白61抗體 規格: 0.2ml

Semen sterculiae lychnophorae胖大海PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周Rabbit Anti-mouse IgG-Fc/PE-Cy5.5  PE-Cy5.5標記的兔抗小鼠IgG-Fc 規格: 0.1ml

Ham's F-10 培養液說明書活細胞染色液(Hoechst 33342)(100×)Hoechst 33342 Living Cell Staining Solution0.1ml|0.5ml|3ml

細胞活力檢測試劑盒(化學發光法)Luminescent Cell Viability Assay Kit100次|500次

Alexa Fluor 488/PI細胞凋亡檢測試劑盒Annexin V-Alexa Fluor 488/PI Apoptosis Detection Kit50次

Annexin V-PE/7-AAD凋亡流式檢測試劑盒Annexin V-PE/7-AAD Apoptosis Detection Kit50次

Annexin V-FITC/PI細胞凋亡檢測試劑盒Annexin V-FITC/PI Apoptosis Detection Kit50次

Annexin V-EGFP/PI雙染細胞凋亡檢測試劑盒Annexin V-EGFP Apoptosis Detection Kit10T|20T|50T|100T

Annexin V-FITC/PI雙染細胞凋亡檢測試劑盒Annexin V-FITC Apoptosis Detection Kit10T|20T|50T|100T

Annexin V-PE細胞凋亡檢測試劑盒Annexin V-PE Apoptosis Detection Kit10T|20T|50T|100T

Annexin V-PE/7-AAD雙染細胞凋亡檢測試劑盒Annexin V-PE/7-AAD Apoptosis Detection Kit10T|20T|50T|100T

Annexin V-APC細胞凋亡檢測試劑盒Annexin V-APC Apoptosis Detection Kit10T|20T|50T|100T