服務(wù)：
我們可以根據(jù)您的應(yīng)用需要，比如在檢測(cè)范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求，而量身定制檢測(cè)試劑盒，有效控制檢測(cè)試劑成本。并可提供免費(fèi)代測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 菜豆凝集素(PHA)ELISA檢測(cè)試劑盒 |
英文名稱 | Phaseolus vulgaris agglutinin (PHA) ELISA Kit |
貨號(hào) | YS-P10109 |
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試劑配制
1、酶聯(lián)板（Assay plate ）：一塊（96孔或者48孔）。
2、標(biāo)準(zhǔn)品（Standard）：2瓶（凍干品）。
3、樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8、底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。
樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（3）尿液：
用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
（4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：
檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。
（5）培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（6）組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。
諾星 70458-96-7 訂購(gòu)|咨詢 規(guī)格： 200mg
脫氧核糖鳥(niǎo)嘌呤核苷酸鈉 訂購(gòu)|咨詢 規(guī)格： 20mg/支
廣金錢(qián)草 訂購(gòu)|咨詢 規(guī)格： 1g
蛇膽汁 訂購(gòu)|咨詢 規(guī)格： 10mg
茶苯明 523-87-5 訂購(gòu)|咨詢 規(guī)格： 100mg
異嗪皮啶 486-21-5 訂購(gòu)|咨詢 規(guī)格： 20mg
甲硝唑 訂購(gòu)|咨詢 規(guī)格： 100mg
頭孢呋辛酯 64544-07-6 訂購(gòu)|咨詢 規(guī)格： 50mg
更昔洛韋 82410-32-0 訂購(gòu)|咨詢 規(guī)格： 100mg
十二烷基酸鈉 151-21-3 訂購(gòu)|咨詢 規(guī)格： 250g
化木蘭花堿 訂購(gòu)|咨詢 規(guī)格： HPLC≥98%,20mg/支;
Hederacolchiside E 33783-82-3 訂購(gòu)|咨詢 規(guī)格： HPLC≥98%;5mg/支
辛酸 62-46-4 訂購(gòu)|咨詢 規(guī)格： HPLC≥98%,20mg/支
喬松素 訂購(gòu)|咨詢 規(guī)格： HPLC≥98%,20mg/支;
羥基積雪草酸 18449-41-7 訂購(gòu)|咨詢 規(guī)格： HPLC≥98%,20mg/支
菜豆凝集素(PHA)ELISA檢測(cè)試劑盒葡萄汁酵母 Saccharomyces uvarumBEL-7404(人肝細(xì)胞)
干酪桿菌 Lactobacillus casei雪白根霉 Rhizopus niveus
BEL-7405(人肝細(xì)胞)苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti
酒假絲酵母 Candida kefyrProtein G Affinity MagBeads/Protein G 磁性親和純化介質(zhì)
豌豆根瘤菌 Rhizobium leguminosarum暫無(wú) Eupenicillium sp.
ME-180(人子宮頸表皮細(xì)胞)黑木耳 Auricularia auricula
頂青霉 Penicillium corylophilium中性蛋白酶(含100mL酶解緩沖液)
指狀青霉 Penicillium digitatum小鼠子宮平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基
人白血病阿霉素耐藥株皮狀絲孢酵母 Trichosporon cutaneum
棲土曲霉 Aspergillus terricola費(fèi)氏中華根瘤菌 Sinorhizobium fredii
靈芝 Ganoderma lucidiumNCI-H1975(人肺腺細(xì)胞)
Poly-L-Lysine Solutiona(5mg/ml)宇佐美曲霉變種 Aspergillus usamii var.
大鼠氣管和支氣管上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基間型酒香酵母 Brettanomyces intermedius
淡紫擬青霉 Paecilomyces lilacinus小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞
HUVEC, 人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞大鼠主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基
蘇云金芽孢桿菌庫(kù)爾斯塔克亞種 Bacillus thuringiensis subsp. Kurstaki狀葡萄球菌狀亞種 Staphylococcus capitis subsp. capitis
操作步驟：
1.編號(hào)：將樣品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào)，每板應(yīng)設(shè)陰性對(duì)照 2 孔、陽(yáng)性對(duì)照 2 孔、空白對(duì)照 1孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）
2.加樣：分別在陰、陽(yáng)性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照 50μl。然后在待測(cè)樣品孔先 加樣品稀釋液 40μl，然后再加待測(cè)樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，
3.溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液：將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用。
5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒后棄去，如此 重復(fù) 5 次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑 50μl，空白孔除外。
7.溫育：操作同 3。
8.洗滌：操作同 5。
9.顯色：每孔先加入顯色劑 A50μl，再加入顯色劑 B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10 分鐘.
10.終止：每孔加終止液 50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
11.測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm 波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD 值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
