購買客戶請先與我司細胞銷售人員核實訂購的產品名稱、種屬、貨號、數量、協商細胞價格并預約發貨期與提取方式。向銷售人員索取細胞說明書并認真閱讀以方便你的實驗操作。產品僅用于科研
| 產品名稱 | DH10B-Plus 電擊感受態細胞 50ul*20 |
| 包裝 | 50ul*20 |
| 分類 | 克隆感受態細胞 |
培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
操作方法：
1. 從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA（質粒或連接產物）并用手EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰中并靜置2分鐘，晃動會降低轉化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養基 (2YT或LB)，混勻后37℃，200 rpm復蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養基上。
5.將平板倒置放于37℃培養箱過夜培養。如果進行藍白斑篩選操作，將平板放37℃培養至少15小時。
FAS/CD95 人凋亡相關因子 規格： 48T/96T
βAPP 人淀粉樣前體蛋白 規格： 48T/96T
Amylase 人* 規格： 48T/96T
ETFB 人電子轉移黃素蛋白β肽 規格： 48T/96T
FⅧAg 人第八因子相關抗原 規格： 48T/96T
Resistin 人抵抗素 規格： 48T/96T
HIF-1α 人低氧誘導因子1α 規格： 48T/96T
LRP-6 人低密度脂蛋白受體相關蛋白6 規格： 48T/96T
LDLR 人低密度脂蛋白受體 規格： 48T/96T
LDL-IC 人低密度脂蛋白免疫復合物 規格： 48T/96T
LDH10B-Plus 電擊感受態細胞 50ul*20DL 人低密度脂蛋白 規格： 48T/96T
LMP7/PSMB9 人低分子質量蛋白7 規格： 48T/96T
LMWH 人低分子肝素 規格： 48T/96T
NGF 人的神經生長因子 規格： 48T/96T
人的牛血清白蛋白殘留檢測ELISA Kit，48T/96T 人的牛血清白蛋白殘留檢測ELISA Kit，48T/96T 規格： 48T/96T
ConA 人刀豆素A 規格： 48T/96T
PLP 人蛋白脂質蛋白抗體 規格： 48T/96T
PR3-ANCA 人蛋白酶3特異性抗中性粒細胞胞質抗體 規格： 48T/96T
注意事項:
1. 產品僅用于科研感受態細胞在冰中緩慢融化，插入冰中8分鐘內加入目標DNA，不可在冰中放置時間過長，長時間存放會降低轉化效率。
2. 混入質粒或連接產物時應輕柔操作。
3. 轉化高濃度的質粒或高效率的連接產物可相應減少Z終用于涂板的菌量。
操作步驟：
1．取感受態細胞置于冰浴中。一次轉化感受態細胞的建議用量為50-100可以根據實際情況分裝使用。以下實驗以50μl感受態細胞為例。
2．待感受態細胞融化后，向感受態細胞懸液中加入目的DNA（根據實際情況加入適量的DNA，通常100 μl感受態細胞能夠被1 ng超螺旋質粒DNA所飽和），用移液器輕輕吹打混勻，冰浴30分鐘。
3．42℃熱擊45秒，迅速將離心管轉移到冰浴中，冰上靜置2-3分鐘
4．每個離心管中加入450μl無菌的SOC或LB培養基（不含抗生素），混勻后置于37℃搖床，150rpm振蕩培養45分鐘使菌體復蘇
5．根據實驗需求，取適量已轉化的感受態細胞，加到含相應抗生素的或LB固體瓊脂培養基上，用無菌的涂布棒將細胞均勻涂開，將平板置于37℃直至液體被吸收，倒置培養，37℃培養12-16小時。
