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| 產品名稱 | BL21-CodonPlus (DE3)-RIPL 感受態細胞 100ul*10 |
| 包裝 | 100ul*10 |
| 分類 | 克隆感受態細胞 |
培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
操作方法：
1. 從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA（質粒或連接產物）并用手EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰中并靜置2分鐘，晃動會降低轉化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養基 (2YT或LB)，混勻后37℃，200 rpm復蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養基上。
5.將平板倒置放于37℃培養箱過夜培養。如果進行藍白斑篩選操作，將平板放37℃培養至少15小時。
IgE 豚鼠免疫球蛋白E 規格： 48T/96T
IgA 豚鼠免疫球蛋白A 規格： 48T/96T
OVA sIgG 豚鼠卵清蛋白特異性IgG 規格： 48T/96T
OVA sIgE 豚鼠卵清蛋白特異性IgE 規格： 48T/96T
CGRP 豚鼠降鈣素基因相關肽 規格： 48T/96T
TIMP-1 豚鼠基質金屬蛋白酶抑制因子1 規格： 48T/96T
BL21-CodonPlus (DE3)-RIPL 感受態細胞 100ul*10MMP-9 豚鼠基質金屬蛋白酶9 規格： 48T/96T
LPO 豚鼠過氧化脂質/乳過氧化物酶 規格： 48T/96T
Lebtospira 豚鼠鉤端螺旋體IgG 規格： 48T/96T
HGF 豚鼠肝細胞生長因子 規格： 48T/96T
TE 豚鼠端粒酶 規格： 48T/96T
MCP-4/CCL13 豚鼠單核細胞趨化蛋白4 規格： 48T/96T
FSH 豚鼠促卵泡素 規格： 48T/96T
SOD 豚鼠超氧化物歧化酶 規格： 48T/96T
iFABP 豚鼠腸脂肪酸結合蛋白 規格： 48T/96T
EGF 豚鼠表皮生長因子 規格： 48T/96T
LTD4 豚鼠白三烯D4 規格： 48T/96T
LTB4 豚鼠白三烯B4 規格： 48T/96T
IL-4 豚鼠白介素4 規格： 48T/96T
IL1Ra 豚鼠白介素1受體拮抗劑 規格： 48T/96T
IL-12/P70 豚鼠白介素12 規格： 48T/
shēng huà shì jì *（牛胰） 容量： 1公斤
shēng huà shì jì 胰蛋白胨水 容量： 100克
shēng huà shì jì 胰蛋白胨膽鹽瓊脂 容量： 100毫升
shēng huà shì jì 胰蛋白胨大豆肉湯 容量： 100克
shēng huà shì jì 胰蛋白胨大豆瓊脂 容量： 50張/盒
shēng huà shì jì 胰蛋白胨 容量： RT 1克
shēng huà shì jì 胰膘肉湯基礎 容量： RT 25克
shēng huà shì jì 銥海棉 容量： 10克
shēng huà shì jì 銥粉 容量： 5克
shēng huà shì jì 依托* 容量： RT 5克
shēng huà shì jì 依斯卡合劑 容量： 200U
shēng huà shì jì 依來鉻氰藍R 容量： 500KU
shēng huà shì jì 衣康酸 容量： RT 25克
shēng huà shì jì 伊文斯藍 容量： RT，避光 5克
shēng huà shì jì 伊紅染液 容量： 10片/箱
shēng huà shì jì 伊紅美蘭瓊脂平板 容量： 1米
shēng huà shì jì 伊紅美蘭瓊脂 容量： 250克
shēng huà shì jì 一氧化錫 容量： 25克
shēng huà shì jì 一氧化硅 容量： 25克
96T
注意事項:
1. 產品僅用于科研感受態細胞在冰中緩慢融化，插入冰中8分鐘內加入目標DNA，不可在冰中放置時間過長，長時間存放會降低轉化效率。
2. 混入質粒或連接產物時應輕柔操作。
3. 轉化高濃度的質粒或高效率的連接產物可相應減少Z終用于涂板的菌量。
操作步驟：
1．取感受態細胞置于冰浴中。一次轉化感受態細胞的建議用量為50-100可以根據實際情況分裝使用。以下實驗以50μl感受態細胞為例。
2．待感受態細胞融化后，向感受態細胞懸液中加入目的DNA（根據實際情況加入適量的DNA，通常100 μl感受態細胞能夠被1 ng超螺旋質粒DNA所飽和），用移液器輕輕吹打混勻，冰浴30分鐘。
3．42℃熱擊45秒，迅速將離心管轉移到冰浴中，冰上靜置2-3分鐘
4．每個離心管中加入450μl無菌的SOC或LB培養基（不含抗生素），混勻后置于37℃搖床，150rpm振蕩培養45分鐘使菌體復蘇
5．根據實驗需求，取適量已轉化的感受態細胞，加到含相應抗生素的或LB固體瓊脂培養基上，用無菌的涂布棒將細胞均勻涂開，將平板置于37℃直至液體被吸收，倒置培養，37℃培養12-16小時。
