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| 產品名稱 | Tuner(DE3) 感受態細胞 100ul*10 |
| 包裝 | 100ul*10 |
| 分類 | 表達感受態細胞 |
培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
操作方法：
1. 從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA（質粒或連接產物）并用手EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰中并靜置2分鐘，晃動會降低轉化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養基 (2YT或LB)，混勻后37℃，200 rpm復蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養基上。
5.將平板倒置放于37℃培養箱過夜培養。如果進行藍白斑篩選操作，將平板放37℃培養至少15小時。
ICAM-1/CD54 人細胞間粘附分子1 規格： 48T/96T
CDC 人細胞分裂周期基因 規格： 48T/96T
CDC 人細胞分裂周期基因 規格： 48T/96T
CTLA-4/CD152 人細胞毒性T淋巴細胞相關抗原4 規格： 48T/96T
CagA 人細胞毒素相關蛋白A 規格： 48T/96T
CTX 人細胞毒素 規格： 48T/96T
IAP 人細胞凋亡抑制因子 規格： 48T/96T
SLE 人系統性紅斑狼瘡 規格： 48T/96T
HEV-IgM 人戊型肝炎病毒IgM 規格： 48T/96T
HEV-IgG 人戊型肝炎病毒IgG 規格： 48T/96T
Pentosidine 人戊糖素 規格： 48T/96T
ACO-2 人烏頭酸酶2 規格： 48T/96T
GM 人胃粘液素 規格： 48T/96T
GIP 人胃抑素 規格： 48T/96T
GCA 人胃泌素細胞抗體 規格： 48T/96T
ProGRP 人胃泌素釋放肽前體 規格： 48T/96T
GRP 人胃泌素釋放多肽 規格： 48T/96T
Gastrin 人胃泌素 規格： 48T/96T
MTL 人胃動素 規格： 48T/96T
PG-C 人*原C 規格： 48T/96T
PG-A 人*原A 規格： 48T/96T
Pepsin 人* 規格： 4
shēng huà shì jì 氯化鈷 容量： 25克
shēng huà shì jì 氯化鉻 容量： 1公斤
shēng huà shì jì 氯化鎘 容量： 500毫克
Tuner(DE3) 感受態細胞 100ul*10shēng huà shì jì 氯化鈣 容量： 500克
shēng huà shì jì 氯化鉍 容量： 100克
shēng huà shì jì 氯代十六烷 容量： 保存：-20℃ 250毫克
shēng huà shì jì 氯代磺酚C 容量： 500克
shēng huà shì jì 氯代癸烷 容量： 保存：-20℃ 1克
shēng huà shì jì 氯測試盒（帶標準） 容量： 10個
shēng huà shì jì 氯鉑酸鉀 容量： 保存：-20℃ 100毫克
shēng huà shì jì 氯鉑酸銨 容量： RT 25克
shēng huà shì jì 氯鉑酸 容量： RT，避光 25克
shēng huà shì jì 氯吡苯脲 容量： 100克
shēng huà shì jì 氯胺T 容量： 1克
shēng huà shì jì 綠色氧化鎳 容量： RT 5克
shēng huà shì jì 綠膿菌素測定用培養基 容量： 25克
shēng huà shì jì 綠膿菌色素測定用培養基 容量： 1米
shēng huà shì jì 鋁酸鈉 容量： 100克
shēng huà shì jì 鋁片 容量： RT 500克
shēng huà shì jì 鋁鎳合金 容量： 500克
8T/96T
注意事項:
1. 產品僅用于科研感受態細胞在冰中緩慢融化，插入冰中8分鐘內加入目標DNA，不可在冰中放置時間過長，長時間存放會降低轉化效率。
2. 混入質粒或連接產物時應輕柔操作。
3. 轉化高濃度的質粒或高效率的連接產物可相應減少Z終用于涂板的菌量。
操作步驟：
1．取感受態細胞置于冰浴中。一次轉化感受態細胞的建議用量為50-100可以根據實際情況分裝使用。以下實驗以50μl感受態細胞為例。
2．待感受態細胞融化后，向感受態細胞懸液中加入目的DNA（根據實際情況加入適量的DNA，通常100 μl感受態細胞能夠被1 ng超螺旋質粒DNA所飽和），用移液器輕輕吹打混勻，冰浴30分鐘。
3．42℃熱擊45秒，迅速將離心管轉移到冰浴中，冰上靜置2-3分鐘
4．每個離心管中加入450μl無菌的SOC或LB培養基（不含抗生素），混勻后置于37℃搖床，150rpm振蕩培養45分鐘使菌體復蘇
5．根據實驗需求，取適量已轉化的感受態細胞，加到含相應抗生素的或LB固體瓊脂培養基上，用無菌的涂布棒將細胞均勻涂開，將平板置于37℃直至液體被吸收，倒置培養，37℃培養12-16小時。
