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產品名稱 | GV3101(pSoup-19) 感受態細胞 100ul*100 |
包裝 | 100ul*100 |
分類 | 表達感受態細胞 |
培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
操作方法:
1. 從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA(質粒或連接產物)并用手EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰中并靜置2分鐘,晃動會降低轉化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養基 (2YT或LB),混勻后37℃,200 rpm復蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養基上。
5.將平板倒置放于37℃培養箱過夜培養。如果進行藍白斑篩選操作,將平板放37℃培養至少15小時。
EMAb 人抗眼肌抗體 規格: 48T/96T
PA-IgG/M/A 人抗血小板抗體IgG/M/A 規格: 48T/96T
ATG 人抗胸腺細胞球蛋白 規格: 48T/96T
SRP 人抗信號識別顆粒抗體 規格: 48T/96T
ACA-IgM 人抗心磷脂抗體IgM 規格: 48T/96T
ACA-IgG 人抗心磷脂抗體IgG 規格: 48T/96T
ACA-IgA 人抗心磷脂抗體IgA 規格: 48T/96T
AMA 人抗心肌抗體 規格: 48T/96T
snRNP/Sm 人抗小核糖核蛋白/Sm抗體 規格: 48T/96T
AMA 人抗線粒體抗體 規格: 48T/96T
GV3101(pSoup-19) 感受態細胞 100ul*100 cmDNA 人抗細胞膜DNA抗體 規格: 48T/96T
AGPA/PCA 人抗胃壁細胞抗體 規格: 48T/96T
ARA 人抗網硬蛋白抗體 規格: 48T/96T
SDA 人抗唾液腺導管組織抗體 規格: 48T/96T
DNP-Ab 人抗脫氧核糖核蛋白抗體 規格: 4
shēng huà shì jì 對甲苯胺鹽酸鹽 容量: 1公斤
shēng huà shì jì 對甲苯胺蘭鈉鹽 容量: 10克
shēng huà shì jì 對甲苯胺蘭 容量: 2~8°C 250克
shēng huà shì jì 對甲苯胺 容量: 100克
shēng huà shì jì 對二甲苯 容量: 25克
shēng huà shì jì 對二胺基亞芐基羅丹寧 容量: RT 25克
shēng huà shì jì 對稱二苯乙炔 容量: RT,避光 10克
shēng huà shì jì 對稱二苯硫脲 容量: 2~8℃ 1克
shēng huà shì jì 對稱二苯基偶氮羰酰肼 容量: RT 5克
shēng huà shì jì 對苯二甲酸二甲酯 容量: 100克
shēng huà shì jì 對苯二甲酸 容量: 500克
shēng huà shì jì 對苯二甲醛 容量: 2~8℃ 5毫克
shēng huà shì jì 對苯二酚 容量: 100毫克
shēng huà shì jì 對苯二胺鹽酸鹽 容量: 2~8℃ 100毫克
shēng huà shì jì 對苯二胺 容量: 100毫克
shēng huà shì jì 對氨基苯甲酸培養基(真菌) 容量: 2~8℃ 500毫升
shēng huà shì jì 對氨基苯甲酸培養基(需氧、厭氧菌) 容量:
8T/96T
注意事項:
1. 產品僅用于科研感受態細胞在冰中緩慢融化,插入冰中8分鐘內加入目標DNA,不可在冰中放置時間過長,長時間存放會降低轉化效率。
2. 混入質粒或連接產物時應輕柔操作。
3. 轉化高濃度的質粒或高效率的連接產物可相應減少Z終用于涂板的菌量。
操作步驟:
1.取感受態細胞置于冰浴中。一次轉化感受態細胞的建議用量為50-100可以根據實際情況分裝使用。以下實驗以50μl感受態細胞為例。
2.待感受態細胞融化后,向感受態細胞懸液中加入目的DNA(根據實際情況加入適量的DNA,通常100 μl感受態細胞能夠被1 ng超螺旋質粒DNA所飽和),用移液器輕輕吹打混勻,冰浴30分鐘。
3.42℃熱擊45秒,迅速將離心管轉移到冰浴中,冰上靜置2-3分鐘
4.每個離心管中加入450μl無菌的SOC或LB培養基(不含抗生素),混勻后置于37℃搖床,150rpm振蕩培養45分鐘使菌體復蘇
5.根據實驗需求,取適量已轉化的感受態細胞,加到含相應抗生素的或LB固體瓊脂培養基上,用無菌的涂布棒將細胞均勻涂開,將平板置于37℃直至液體被吸收,倒置培養,37℃培養12-16小時。