具有如下優(yōu)點:
一、高效、靈敏、特異的抗體;
二、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;
四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標本類型;
五、性價比非常好,節(jié)省實驗經(jīng)費。
產(chǎn)品名稱:PPI elisa試劑盒規(guī)格
英文名稱:PPI elisa Kit
規(guī)格:48T/96T
保存: 2-8℃(頻繁使用時);-20℃(長時間不用時)。
有效期: 6 個月(4℃);12 個月(-20℃)。
用途: 用于體外定量分析人血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清、細胞裂解液
選擇ELISA試劑盒應(yīng)從靈敏度、特異性、精密度、穩(wěn)定性、簡便性、安全性及經(jīng)濟性全面評價。?
操作流程如下:
(1)僅用于科研待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。?
注意事項:
1加樣:
①實驗樣本過多時,可分批次操作,以減少實驗時間延長造成的誤差;
②加酶試劑后,用吸水紙吸干孔外試劑;
③作定量試驗時,使用加樣器加注試劑,并經(jīng)常校正其準確性,此外,要做到一份樣本一個移液頭,防止交叉污染。
2.溫育:
①如有兩種溫度,盡量使用較低的溫育溫度、較長反應(yīng)時間的條件;
②用1個小溫度計放置在板孔反應(yīng)液中測量觀察;
③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學梯度會造成“邊緣效應(yīng)”,因此盡量采用水浴;
3.洗板:
①手工洗板時,拍板時要垂直,避免交叉污染,用力不能過猛,防止抗原抗體復(fù)合物脫離;
②洗板機洗板時應(yīng)經(jīng)常檢查沖洗頭是否通暢,若被雜物堵塞時可用注射器針頭挑出;
③為了洗滌效果好,實驗室可采用機器與人工洗滌相結(jié)合的方法,在機器洗滌后再進行人工洗板1-2次,或適當增加洗板的次數(shù);
4.顯色:
ELISA試劑盒中,如以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物,則提供的底物為A和B兩瓶應(yīng)用液;如以鄰苯二胺(OPD)為底物,則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑。顯色反應(yīng)條件為37℃或室溫反應(yīng)15-30 min。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑,要臨用前30 min配制且必須避光。以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光,但A、B液應(yīng)盡量避免接觸金屬器械。
5.判定:
讀取結(jié)果要在15-30 min內(nèi)完成,定性測定用肉眼判讀試驗結(jié)果時,反應(yīng)板應(yīng)水平距離白色背景10-15 cm;定量測定時用酶標儀讀取結(jié)果,酶標儀不應(yīng)置于陽光或強光照射下,需先預(yù)熱15-30 min再進行測試。
試劑配制:
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標準品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
Massilia dura sp. nov.IGSF9 疫球蛋白超家族成員9抗體100 ul
Massilia sp.IGSF10 免疫球蛋白超家族成員10抗體100 ul
Stachybotrys chlorohalonataIGSF11 大腦和特異性免疫球蛋白超家族成員11抗體300 ul
Ulocladium botrytisIGSF12/CD300 免疫球蛋白超家族成員12抗體100 ul
變鉛青鏈霉菌IGSF16/CD300C 免疫球蛋白超家族成員16抗體100 ul
大腸埃希氏菌DH5a/pEGFP-CEM15IGSF21 免疫球蛋白超家族成員21抗體100 ul
大腸埃希氏菌DH5α/T/gfpGDPD2/GDE3 促進成骨細胞分化因子抗體20 ul
大腸埃希氏菌DH5α/T/linker-gfpGDPD3 甘油磷酸二酯酶磷酸結(jié)構(gòu)域3抗體100 ul
反卷毛殼GDPD5 甘油磷酸二酯酶磷酸結(jié)構(gòu)域5抗體100 ul
放射土壤桿菌CSPP1 中心體和紡錘體極相關(guān)蛋白1抗體100 ul
分枝桿菌屬菌種ZPI/SERPINA10 絲氨酸蛋白酶抑制劑A10抗體500 ul
甘蔗鐮孢菌SERPINB1 絲氨酸蛋白酶抑制劑B1抗體100 ul
橄欖網(wǎng)狀鏈霉菌SERPINB10 絲氨酸蛋白酶抑制劑B10抗體20 ul
旱地小單孢菌SERPINB11 絲氨酸蛋白酶抑制劑B11抗體100 ul
礪灰鏈霉菌康定變種SERPINB12 絲氨酸蛋白酶抑制劑B12抗體100 ul
綠黃馬杜拉放線菌福建新變種SERPINB3 絲氨酸蛋白酶抑制劑B3抗體100 ul
毛莖點霉屬菌種Cystatin D 胱抑素D/半胱氨酸蛋白酶抑制劑D抗體100 ul
擬青霉菌屬菌種CST8/Cystatin 8 胱抑素8/半胱氨酸蛋白酶抑制劑8抗體20 ul
CINC-3 Human CINC-3 Kit 規(guī)格: 96T/48T
CINC-2a/b Human CINC-2a/b Kit 規(guī)格: 96T/48T
CINC-1 Human CINC-1 Kit 規(guī)格: 96T/48T
CD40L Human CD40L Kit 規(guī)格: 96T/48T
CD30配體(sCD30 L)分析檢測試劑盒 Kit Human Soluble CD30 ligand Kit 規(guī)格: 96T/48T
CD30 Human CD30 Kit 規(guī)格: 96T/48T
PPI elisa試劑盒規(guī)格Aspergillus│niger提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 甘蔗淺盤發(fā)酵生產(chǎn)檸檬酸。培養(yǎng)基: CM0085生長條件: 28-30℃存儲條件: 定期移植法;其他
Ruegeria│atlantica分離基物: 生物樣/軟珊瑚提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 潛在的生物活性微生物/軟珊瑚共附生菌,用于篩選活性物質(zhì)產(chǎn)生菌;產(chǎn)酶微生物/脂酶(三丁酸甘油酯).培養(yǎng)基: 471生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Escherichia│coli分離基物: 環(huán)境污水提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 抗藥性檢驗培養(yǎng)基: 335生長條件: 37存儲條件: 真空冷凍干燥法;
Aspergillus│niger提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 糖蜜發(fā)酵生產(chǎn)檸檬酸。培養(yǎng)基: CM0085生長條件: 28-30℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
Rhizopus│stolonifer (Ehrenb.) Vuill.分離基物: 根際土壤提供形式: 斜面培養(yǎng)物模式菌株: no培養(yǎng)基: 14生長條件: 26存儲條件: 定期移植法
Staphylococcus│bovis分離基物: 患病奶牛提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 用于科研培養(yǎng)基: 335生長條件: 37存儲條件: 真空冷凍干燥法;
Colletotrichum│orbiculare (Berk. & Mont.) Arx分離基物: 南瓜提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 14生長條件: 26存儲條件: 定期移植法
Agaricus│placomyces Peck分離基物: 子實體提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 可食或有毒、菌根菌培養(yǎng)基: 14生長條件: 25存儲條件: 定期移植法
Penicillium│sp.分離基物: 枯枝枯葉提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 產(chǎn)生真菌毒素培養(yǎng)基: CM0014生長條件: 26C存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥