公司細胞現貨供應，質量有保證、*、實驗效果好，我司為您提供免費代測服務，同時提供最新價格、說明書、規格、用途、實驗原理等相關操作說明。
產品名稱 | SV-40Z轉化肺成纖維細胞：WI38/VA13 |
規格 | 1×10?cells/T25培養瓶 |
分類 | 細胞系 |
貨號 | GOY-01X0462 |
商品介紹：
名稱 SV-40Z轉化肺成纖維細胞：WI38/VA13 別稱WI 38 VA13 subline 2RA; WI 38 VA-13 subline 2RA; WI 38VA13 subline 2RA; WI-38 VA13 sub 2 RA; WI38-VA13 subline 2RA; WI38 VA13/2RA; WI-38 VA13; WI 38 VA 13; WI38/VA13; WI38VA13; VA-13; VA13; AG07217; AG7217 年齡（性別）女 組織來源肺 生長特性貼壁細胞 細胞形態上皮細胞樣 背景描述WI38/VA13細胞是于1964年建系，源自3個月胎齡的女性胚胎的肺成纖維細胞，經SV-40轉化。 生物安全等級2 生長培養基MEM＋10% FBS＋1% P/S 推薦傳代比例1:2-1:4 推薦換液頻率2~3次/周 凍存條件 凍存液：55% 基礎培養基+40%FBS+5%DMSO 溫度：液氮 培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5% 溫度：37℃ |
使用方法：
收到細胞后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細胞培養箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩定細胞狀態。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養瓶中的培養基，用PBS清洗細胞一次；
2) 添加0.125%消化液約1mL至培養瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入*培養液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的*培養基至5mL，放入37℃，5% CO2細胞培養箱中培養；
4) 待細胞*貼壁后，培養觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養基。
培養操作：
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養基，培養過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養基終止消化，可使用血球計數板計數。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞，根據細胞數量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液，注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
細胞培養操作規程：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
大鼠 Semaphorin 4D / SEMA4D / CD100 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 CD68 / Macrosialin 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 CD47 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 REG1A / PSPS 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 CD59 / CD59A / MAC / IP 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 CD59 / CD59A / MAC-IP 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 CD48 /ows\system32\EhStorShell.dll
SV-40Z轉化肺成纖維細胞：WI38/VA13 SCCA/SERPINB4 蛋白抑制劑B4抗體(鱗狀細胞抗原) 規格: 0.2ml
TSARG4 生細胞凋亡相關基因4抗體 規格: 0.1mlDUX3 DUX3蛋白抗體 規格: 0.2ml
100mL 紅細胞裂解液A型 (核酸純化) Red Cell Lysis Solution ,Type A 4℃保存
2 ug pGEX-KG pGEX-KG 低溫運輸，-20℃保存
2 ug pECFP-Peroxi pECFP-Peroxi 低溫運輸，-20℃保存
250 T 過氧化氫定量分析試劑盒（水兼容性） Oxidative Stress Detection Kit 常溫保存
250mL RNase-Free Tris-HCl Solution（無RNase的Tris-HCl溶液）,1M,pH8.0 RNase-Free Tris-HCl Solution,1M,pH8.0 常溫保存
肉湯培養基G Broth medium G(MacConkey broth) 250g
1g 氯化金 Gold（Ⅲ）Chloride 室溫密封保存
1g 酸性 Phosphatase，Acid -20℃保存
100mL 紅細胞裂解液C型（核酸純化） 4℃保存
2 ug pPZp-RCS2-Bar pPZp-RCS2-Bar 低溫運輸，-20℃保存
