別 名 p-Raf-1(Ser338/Tyr340);RAF1; murine leukemia viral (v-raf-1) oncogene homolog 1 (3611-MSV); v-raf-1 murine leukemia viral oncogene homolog 1; cRaf; C-RAF; proto-oncogene c-RAF; 6430402F14Rik; AA990557; BB129353; c-Raf; Craf1; D830050J10Rik;
產(chǎn)品名稱 | 中文名稱 | 貨號 |
| Anti-Phospho-ARaf(Ser299)抗體 | 磷酸化原癌基因c-Raf抗體 | GOY-01K65220 |
英文名稱 Anti-Phospho-ARaf(Ser299)
中文名稱 磷酸化原癌基因c-Raf抗體
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/100μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Guinea Pig
產(chǎn)品類型 一抗 磷酸化抗體
研究領(lǐng)域 腫瘤 細(xì)胞生物 染色質(zhì)和核信號 神經(jīng)生物學(xué) 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞凋亡 細(xì)胞周期蛋白 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子 激酶和磷酸酶 細(xì)胞分化
蛋白分子量 predicted molecular weight: 73kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated Synthesised phosphopeptide derived from human c-Raf around the phosphorylation site of Ser338/Tyr340
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
（石蠟切片需做抗原修復(fù)）
not yet tested in other applications.
optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
保存條件 Store at -20 °C for one year.
含試劑：
1、一抗（應(yīng)用：IHC-P=1:400-800 IHC-F=1:400-800 ）
2、無色試劑：內(nèi)源性過氧化物酶阻斷劑
3、試劑A：封閉用正常山羊血清工作液
4、試劑B：標(biāo)記二抗工作液：標(biāo)記羊抗兔IgG
5、試劑C：辣根酶標(biāo)記鏈酶卵白素工作液
6、顯色液D液 (棕色) 1ml
7、顯色液E液（白色）20ml
實驗前準(zhǔn)備：
安裝步驟與維護(hù)一）一抗稀釋的準(zhǔn)備：
方法1. 實驗前，將凍干粉抗體用無菌蒸餾水稀釋（或PBS稀釋），將稀釋后的抗體分裝5-10支（20ulx5支或10ulx10支），放入-20℃保存，用一支拿一支，避免反復(fù)凍溶。
方法2. 實驗前,也可將凍干粉抗體用無菌蒸餾水稀釋50ul（或PBS稀釋50ul）成原液:再加50%甘油, 放入-20℃保存，用多少吸多少。
方法3. 預(yù)試驗可做幾個梯度1：100、200、400背景高還可做上去，選一個適合的稀釋比例，再正式做。工作液的稀釋-使用抗體稀釋液。
二）DAB顯色液的制備實驗準(zhǔn)備：在1毫升試劑E（DAB 底物液）中，加入1滴（約50微升）試劑D（DAB濃縮液），混合均勻，即配成DAB工作液。此溶液必須現(xiàn)用現(xiàn)配，配好后避光保存，6小時內(nèi)使用，剩余的液體應(yīng)棄去。標(biāo)本顯色時間一般為室溫 5~20分鐘，請在顯微鏡下觀察顯色的情況，顯色充分后應(yīng)將標(biāo)本及時脫水封固。
實驗步驟：
1、石蠟切片，常規(guī)脫蠟至水
2、蒸餾水沖洗，pbs 浸泡5 分鐘（如需采用抗原修復(fù)，在此步驟后進(jìn)行）。
3、3%雙氧水去離子水（無色液體）孵育15-20 分鐘，以消除內(nèi)源性過氧物酶活性。
4、滴加試劑A（藍(lán)色液體）室溫孵育15-20 分鐘，傾去，勿洗。
5、滴加適當(dāng)比例稀釋的一抗，37℃孵育2-3 小時或4℃過夜。
6、PBS 沖洗，3 分鐘3 次。
7、滴加試劑B（黃色液體），室溫或37℃孵育15-20 分鐘。
8、PBS 沖洗，3 分鐘3 次。
9、滴加試劑C（橙色液體），室溫或37℃孵育15-20 分鐘。
10、PBS 沖洗，3 分鐘3 次。
11、顯色劑顯色（DAB 或AEC）
12、自來水充分沖洗。
13、如果需要，可進(jìn)行復(fù)染，脫水，透明。
14、選擇適當(dāng)?shù)姆馄瑒┓馄?/span>
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