Benzonase 核酸酶

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產品介紹：

Benzonase 核酸酶

是來自經基因工程改進的核酸內切酶。它能降解所有形式(包括單鏈，雙鏈，線性和環狀)的 DNA 和 RNA 而沒有蛋白裂解活性，在廣泛條件范圍具有很高的特異性。它將核酸消化成3-5 堿基長度（雜交限度以下）的 5’-單磷酸寡核苷酸，從重級蛋白中去除核酸的操作，符合 FDA 關于核酸污染的處理規程。Benzonase 核酸酶迅速水解核酸的能力使該酶成為降低粘度以減少處理時間和增加蛋白產量的選擇。該酶與BacReady-Protein Extraction Solution和RIPA LysisBuffer 等蛋白抽提試劑配合使用，從而消除粗提物中的核酸，降低粘度。

單位定義：在 30 分鐘內使△A260 值降低 1.0(相當于消化 37 μg DNA )的酶量定義為一個活性單位。
應用
蛋白提取時去除核酸污染
2D 凝膠電泳
Western Blot
IP- Western
儲存：置于-20°C 保存。
操作方法
1. 組織處理方法：將 30-50mg 動植物組織研磨充分后，加入 100-200 μl RIPA 裂解液，同時加入 1 μlBenzonase 核酸酶，旋渦振蕩混合均勻，室溫孵育 30min。
2.細胞處理方法：將 106-107懸浮細胞液 6,000 rpm 離心10min 后，棄掉上清液，使用 100 μl RIPA 裂解液重懸細胞，同時加入 1μl Benzonase 核酸酶，旋渦振蕩混合均勻，室溫孵育 30min。注意：貼壁細胞重懸于 PBS 后，處理方法同懸浮細胞。
3. 大腸桿菌細胞處理：將 500 μl E.coli 培養液 8,000rpm 離心 5min 后，棄掉上清液，使用 100 μl 大腸桿菌裂解液重懸細胞，同時加入 1μl Benzonase 核酸酶，旋渦振蕩混合均勻，室溫孵育 30min。
4. 裂解步驟完成后，將裂解產物于 13,000 rpm 離心 10min后，取上清即為提取蛋白（包涵體蛋白留取沉淀為提取蛋白）。
5. 提取完蛋白后可利用 BCA 蛋白定量試劑盒測定蛋白濃度。

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