熱敏雙鏈DNA特異性核酸酶(HL dsDNase)

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產品介紹：

熱敏雙鏈DNA特異性核酸酶(HL dsDNase)熱 敏 雙 鏈 DNA 特 異 性 核 酸 酶 (Heat labileds-DNA-specific Nuclease ，又名 ezDNase 或 HLdsDNase)，為雙鏈特異性核酸酶。其特異性的識別降解雙鏈 DNA，對單鏈 DNA 或 RNA 幾乎無活性，其降解 dsDNA的能力比 ssDNA 高~5000 倍。除此外，該酶降解雙鏈 DNA的能力比 bovine DNaseI 高~30 倍，因此特別適用于去除RNA 樣品中的基因組 DNA 污染。該熱敏型雙鏈 DNA 核酸酶可將 DNA 降解為 2~8bp 的產物，且 55℃ 5min 可使該酶不可逆失活，同時又能保持 RNA 和 ssDNA 的穩定性。除此外，本酶適合于，對基因組樣品進行酶法片段化反應。

儲存：-20℃ 可保存 3 年。
活性定義： 1 單位指 25°C 條件下 15min 將 10μg 基因組DNA 消化至 80%的產物<500bp，所需的酶量。
使用注意事項
（1）1×dsDNase Buffer：20mM Tris-HCl pH8, 5mM MgCl2。該酶需要 1~5mM MgCl2。
（2）該酶對 K+敏感，反應體系中推薦 K+濃度低于 40mM。
（3）通常在 RT 反應中的用量為 0.1~0.5U/20 μl 體系。
（4）任何濃度的 SDS、鹽酸胍均抑制該酶活性。
（5）該酶的最佳反應溫度為 25~37℃，42℃ 30min 后活性損失 70%。
使用實例 1（對基因組 DNA 進行片段化反應）
1. 按以下組分配制反應體系
基因組 DNA 10 μg
10×dsDNase Buffer 2.5 μl
HL dsDNase (2 U/μl) 0.5-1 μl
Rnase Free H2O Up to 25 μl
2. 室溫 25°C 孵育 15min，55~65°C 5min 加熱失活。
使用實例 2（基因組 DNA 的去除）
1. 按以下組分配制反應體系
基因組 DNA 1 μg
10×dsDNase Buffer 2.5 μl
HL dsDNase (2 U/μl) 1 μl
Rnase Free H2O Up to 25 μl
2. 室溫 25°C 孵育 30min，55~65°C 5min 加熱失活。此時
基因組 DNA，通常 90%以上的產物被消化至<15bp

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