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名稱 | NCI-H446 [H446] (人小細胞肺癌細胞) (STR鑒定正確) |
別稱 | H446; H-446; NCI-446; NCIH446 |
種屬 | 人類 |
年齡（性別） | 男性，61歲 |
組織來源 | 肺；轉移灶：肋膜滲出癌；小細胞肺癌 |
生長特性 | 半貼半懸 |
細胞形態 | 上皮細胞樣 |
背景描述 | NCI-H446細胞是從一位小細胞肺癌患者的胸水中建立的，NCI-H446細胞的原始形態并不具有小細胞肺癌特征。NCI-H446細胞是小細胞肺癌的生化和形態學上的變種，表達神經元的烯醇酶和腦部肌酸激酶同功酶。NCI-H446細胞內左巴脫羧酶、蠶素、抗利尿激素、催產素或胃泌激素釋放肽未達到可檢測水平。C-myc DNA序列擴增約20倍，c-myc RNA比正常細胞增加15倍。最初，傳代培養基用RPMI-1640(含5%胎牛血清、10nM氫化可的、0.005mg/ml胰島素、0.01mg/ml鐵傳遞蛋白、10nM 17-β-雌二醇、30nM亞硒-酸鈉)。 |
生物安全等級 | 1 |
生長培養基 | RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S |
推薦傳代比例 | 1:3-1:4 |
推薦換液頻率 | 2~3次/周 |
凍存條件 | 凍存液：55% 基礎培養基+40%FBS+5%DMSO 溫度：液氮 |
培養條件 | 氣相：空氣，95%；CO2，5% 溫度：37℃ |
致瘤性 | Yes, in nude mice (The cells form transplantable tumors with non-typical SCLC histology). |
保藏機構 | ATCC; HTB-171 |
細胞系跟細胞株的區別：
1、細胞株：NCI-H446人小細胞肺癌細胞原代培養的細胞一般傳至10代左右就不容易傳下去了，細胞的生長就會出現停滯，大部分細胞衰老死亡。但是有極少數的細胞能夠度過“危機”而繼續傳下去，這些存活的細胞一般能夠傳到40--50代，這種傳代細胞叫做細胞株。
2、細胞系：細胞株的遺傳物質沒有發生改變。當細胞傳至50代以后又會出現“危機”，不能再傳下去。但是有部分細胞的遺傳物質發生了改變，并且帶有癌變的特點，有可能在培養條件下無限制地傳代下去，這種傳代細胞稱為細胞系。
注意事項：
1. 細胞較難消化，需要延長消化時間，消化收縮變圓時，輕拍側邊方可終止消化
2. 推薦使用培養基，10%胎牛血清
3. 推薦傳代比例為1:3至1:4，建議37度消化3-4分鐘
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收到細胞后如何操作:
1、首先，觀察細胞瓶是否完好，培養液是否有漏液、渾濁等現象。若有，請及時與我司技術支持聯系。
2、用75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題，部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落，將細胞置于細胞培養箱內靜置培養，隔天再取出進行觀察。
3、仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如細胞形態、所用培養基、血清比例、所需細胞因子等。
4、可將培養瓶內多余的培養基轉移至50ml無菌離心管中，備用；細胞傳代時，可以將該培養基按照一定比例和客戶自備的培養基混合使用，讓細胞逐漸適應培養條件。
5、確認細胞狀態良好后，應及時將細胞凍存，再進行后續的實驗，避免后期實驗失誤可能發生細胞污染或死亡而導致的細胞丟失。
6、建議客戶收到細胞后前3天，100X、200X、400X各拍3-5張細胞照片，記錄細胞狀態，便于和我們技術支持溝通交流。
