組成及試劑配制:
1、酶標(biāo)板：一塊（96孔）
2、 標(biāo)準(zhǔn)品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測稀釋液B：1×10ml。
服務(wù)流程：
公司產(chǎn)品僅用于科研接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
鮑曼不動桿菌檢測試劑盒（熒光PCR法） | 50T | YS-P013809 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性；
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細(xì)胞中檢出一個靶細(xì)胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達(dá)3個RFU(空斑形成單位)；在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個細(xì)菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板。可直接用臨床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC最好隨機(jī)分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)第二個堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列最好有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。
兔分裂周期蛋白23(CDC23)雙(4-溴)(>98.0%(GC))磷酸化核糖體S6蛋白激酶抗體
兔血小板相關(guān)補(bǔ)體3(PAC3) 雙(4-)(>98.0%(GC))磷酸化核糖體S6蛋白激酶抗體
兔核孔蛋白155kda(NUP155)雙(4-叔丁)(>90.0%(GC))磷酸化Rho相關(guān)蛋白激酶2抗體
兔重去腎上腺素(NEB)雙(4-)(>98.0%(HPLC))磷酸化Rho相關(guān)蛋白激酶2抗體
兔糖化白蛋白(GA) N,N'-二-1,4-二(>95.0%(T))磷酸化Rho相關(guān)蛋白激酶2抗體
兔嗜鉻蛋白A/胰抑制素(CgA/Pancreastatin) 4,4'-二氧二(>98.0%(GC)(T))磷酸化G蛋白信號轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)因子19抗體
兔降鈣素受體(CTR) N,N'-二-2-萘-1,4-二(>96.0%(N))磷酸化Rad51抗體
兔β2糖蛋白1抗體IgM(β2-GP1 Ab IgM)N,N'-二聯(lián)(>98.0%(HPLC)(N))磷酸化核糖體S6激酶RSK2抗體
兔硒蛋白1(SEP1)p,p'-二(>97.0%(GC))磷酸化絲氨酸/蘇氨酸激酶p90RSK蛋白抗體
兔肌肉糖原磷酸化酶(PYGM) m,m'-二聯(lián)(>98.0%(GC))磷酸化磷酸化絲氨酸/蘇氨酸激酶p90RSK蛋白抗體
兔胎蛋白異質(zhì)體3(AFP-L3) 4-(二氨)二腙(>98.0%(HPLC)(N))磷酸化絲氨酸/蘇氨酸激酶p90RSK蛋白抗體
兔血幼素(HJV/HFE2) 1,1'-二萘(>98.0%(HPLC)(N))RNA結(jié)合因蛋白3抗體
兔αL艾杜糖酸酶(IDUα) 2,2'-二萘(>98.0%(GC))ras癌因家族Rab5蛋白抗體
兔Ras-GTP酶激活蛋白1(Ras-GAP1)1,2'-二萘(升華精制品)(>98.0%(HPLC)(N))ras癌因家族Rab11蛋白抗體
兔干因子(SCF)2,4-二二(>98.0%(GC))視黃結(jié)合蛋白4抗體
兔S100鈣結(jié)合蛋白A11(S100A11) N,N'-二對聯(lián)(>98.0%(GC))胰島再生因子ICRF抗體
鮑曼不動桿菌檢測試劑盒（熒光PCR法）IL-31/FITC 熒光素標(biāo)記白介素31抗體IgG二十八烷 standard for GC, ≥98.5% (GC)
IL-31RA/CRL3/FITC 熒光素標(biāo)記白介素31受體a抗體IgG二十八烷 99%
IL-32/NK4/FITC 熒光素標(biāo)記白介素32抗體IgG二十八烷 分析標(biāo)準(zhǔn)品, ≥99% (GC)
IL-33/NFHEV/FITC 熒光素標(biāo)記白介素33抗體IgG鍺試劑 AR
IL-33/FITC 熒光素標(biāo)記白介素33抗體IgG鄰菲啰啉鹽酸鹽，一水 99%
ILK-1/FITC 熒光素標(biāo)記整合素連接激酶-1抗體IgG熒光桃紅B AR,Dye content ≥80 %
ILT2/CD85j/FITC 熒光素標(biāo)記表面免疫球蛋白樣轉(zhuǎn)錄因子2抗體IgG熒光桃紅B 高純級,≥97.0 %
ILTV/FITC 熒光素標(biāo)記抗雞傳染性喉氣管炎病抗體IgG3-戊酮 Standard for GC, ≥99.5% (GC)
